花椒生物碱成分分离、感官评定及药理作用研究

花椒(Zanthoxylum bungeanum)属芸香科(Rutaceae)植物,是我国一种传统药食两用原料。生物碱具有抗炎止痒、镇痛杀菌和抗肿瘤等多种生理活性。花椒中生物碱含量丰富,但国内外对其研究较少。本文对花椒生物碱的测定方法进行了研究,采用溶剂浸提法提取花椒生物碱,优化提取工艺后对其进行分离纯化、感官评定和活性研究。试验主要内容如下： 选用乙醇作为溶剂,先进行单因素试验,再通过正交试验设计方法,以总生物的得率为考察指标,考察温度、提取时间、乙醇浓度、pH对花椒生物碱的得率的影响。结果显示各因素对生物碱提取得率的影响程度由大到小依次为：乙醇浓度>pH值>提取温度>提取时间,最佳提取工艺条件为：乙醇浓度70%,pH值为3,提取温度60℃,料液比1：20,提取提取时间3h,总生物碱的平均得率为0.8898%。 研究大孔树脂纯化花椒总生物碱的条件。利用NKA-9大孔树脂吸附纯化花椒生物碱,通过薄层色谱法和紫外分光光度法鉴定生物碱。结果表明,大孔树脂纯化花椒生物碱的洗脱条件为,将花椒提取液上柱吸附2 h,依次用3倍柱体积的水,50%、70%的乙醇进行洗脱；70%乙醇洗脱部分为生物碱,50%乙醇洗脱部分为黄酮类物质；花椒生物碱可达到分离和纯化的目的。 应用高速逆流色谱法从花椒中分离生物碱,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5：5：7：5)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流速2mL/min,仪器转速800r/min,检测波长254 nm,上样量800mg。通过逆流色谱可获得A(130 mg)和B(15 mg),TLC分析为生物碱,HPLC检测纯度分别为92.8%和85.4%,结果表明HSCCC对于制备、分离纯化花椒生物碱具有较大的优越性。 感官评价是一门人类通过味觉、触觉、视觉、嗅觉和听觉而感知感觉并制定、测量、分析和说明感觉的学科。本研究参考辣椒辣度的测定方法,用乙醇提取测试样品中的麻味成分,然后过滤,将该提取液制成不同麻味浓度的糖水溶液,通过感官分析品评,找出刚好尝出麻味时溶液的稀释倍数,由此计算麻度级别。结果显示花椒醇提物、花椒大孔树脂洗脱物的麻度级别分别为七级、八级。该评定方法操作简单,结果可靠,可以考虑作为花椒及其制品的麻度测定方法之一。 皮肤瘙痒症为常见、多发病,是由组胺、蛋白酶、血管舒张素及某些肽素等介质刺激皮肤,引起的一种病症。对于皮肤瘙痒治疗以改善瘙痒症状为核心,如能兼顾抗炎、镇痛和抑制皮肤化脓性感染则疗效更好。本文探讨花椒生物碱局部外涂的药理作用,采用滤纸片法、小鼠热板法、二甲苯致炎法及低分子右旋糖酐-40诱发小鼠皮肤瘙痒法研究花椒生物碱在抑菌、镇痛、抗炎、止痒方面的作用。结果显示花椒生物碱对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,能较强抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀,能提高小鼠对热的痛阈值及致痒阈值,且持续时间较长,与空白对照组比较差异显著。由此可见,花椒生物碱具有较强的抑菌、抗炎、镇痛、止痒作用,有待进一步开发研究。