颐神达络方药效物质基础研究

颐神达络方是著名中医王永炎院士治疗脑血管疾病的经验方，由赤芍、葛根、人参三味中药组成，功效为益气、活血、健脑。临床主治血管性痴呆（vascular dementia，VD）。主要药效研究显示：颐神达络方的有效部位具有较其方剂更强的抗脑缺血作用，能较好地保护缺血性脑损伤，具有健脑益智，抗脑衰之功效。 本论文分六章。 第一章 文献研究 对中药复方化学与创新药物研究的现状进行综述；对近年来有关参颐神达络方中各单味药的化学成分和药理学研究进展进行综述，共引文献144篇。 第二章 颐神达络方有效部位制备工艺研究 对颐神达络方有效部位的制备工艺进行研究。根据本课题前期工作中提取工艺的研究结果，采用优化的提取工艺提取颐神达络方，提取物用大孔吸附树脂柱制备有效部位。以最大吸附量和吸附—解吸率为考察指标，筛选了五种不同型号的树脂，确定C型树脂为制备有效部位的树脂。以葛根素、芍药苷和人参总皂苷为考察指标，筛选了大孔树脂的各个工艺参数。确定的工艺条件为：颐神达络方用Q％乙醇回流提取L次，Yh／次，B倍溶剂／次，提取液合并减压回收并干燥。提取物用相当于X2倍药材量的水稀释，超声40min，4000转／离心40min，得到55mg／ml的上样溶液。上样溶液以V1ml／min的流速上样，树脂柱径高比为J1，上样量与树脂体积比为3：1：以S2倍树脂体积的水清洗树脂柱后，用N3％乙醇洗脱，洗脱剂用量为2.5倍树脂体积，洗脱流速为L2ml／min。 对颐神达络方有效部位的制备工艺进行了验证。3批样品的制备和含量测定结果表明有效部位的制备工艺合理、稳定。有效部位的得率为4～5％，其中葛根素含量19～21％，3′-甲氧基葛根素5～6％，芹糖基葛根素3～4％，大豆苷5～6％，芍药苷11～14％，人参总皂苷20～22％，总含量在50％以上，符合有效部位的要求。 第三章 颐神达络方有效部位化学成分研究 研究颐神达络方的化学成分。采用多种色谱分离方法(AB-8型大孔吸附树脂、硅胶、Toyopearl HW-40、pharmadex LH-20、聚酰胺、MCI Gel CHP-2、YMC C18反相硅胶、制备薄层色谱等)和结构解析技术(1HNMR、13CNMR、DEPT、HMQC、HMBC、EI-MS、ESI-MS等)，以及化学方法，对颐神达络方中赤芍和葛根两药相应有效部位的化学成分进行了研究，用分离得到的化合物和课题组从其它课题中得到的人参皂苷对颐神达络方提取物和有效部位HPLC指纹图谱中的主要色谱峰进行指认。 从赤芍相应有效部位中分离鉴定了15个化合物，其中单萜类化合物9个：（1S，2S，4R）-反式-2-羟基-1，8-桉叶素（CS—24）、（1S，2S，4R）-反式-1，8-桉叶素-2-0-β-D-葡萄糖苷（CS—13）、一单萜类化合物的二糖苷（CS—23）、4—乙基芍药苷（CS—14）、9—乙基芍药新苷A（CS—21）、芍药苷（CS—B）、苯甲酰芍药苷（CS—15）、