透明质酸的生物合成及其纯化

本文分别对种子培养基和发酵培养基进行优化，确定了以淀粉为碳源的培养基培养兽疫链球菌NJUST01。最佳种子培养基成分为：可溶性淀粉1.7％；酵母浸出粉2.0％；KH2PO41.0％；K2HPO41.0％；MgSO4·7H2O1.0％；pH7.0（自然），35℃培养18h。并用此培养基进行了60代传代培养，实验证明传代后菌株及其生产HA的能力没有明显改变。分别对发酵培养基的C／N、无机盐、添加剂、接种量、时间、溶氧量、pH等方面进行优化。最终确定最佳发酵培养基：可溶性淀粉4％；酵母浸出粉1.5％；KH2PO41.0％；K2HPO41.0％；MgSO4·7H2O1.0％；CaCO31.0％；MnSO40.06％；（NH4）2SO40.06％；pH7.0（自然），35℃培养36h，接种量为10％，转速250转／分。 本文比较了不同分离纯化发酵产HA的方法，最终确立了以冷藏去蛋白质，CPC选择性沉淀得到HA产品的提取纯化工艺。最终得到HA产量为3.5g／L，分子量为2.047×10～5Da。 本论文测试了外源HA对抗生素抑制链球菌的效果，结果表明在培养基中加HA后，抗生素的抑菌效果有一定程度的提高。