大豆异黄酮对蛋鸡免疫功能、抗氧化反应及肠道组织结构的影响

大豆异黄酮(Soy isoflavones,ISO)属于植物雌激素,它主要存在于豆科植物中,其中在大豆中含量最高,其主要成分是黄豆营元(Daidzein)、染料木素(Genistein)和大豆黄素(Glycitein)。ISO的生理活性多样,具有弱雌激素活性、降血.脂、强心、抗肿瘤、抗氧化等作用,是大然药物的重要成分。ISO在动物生产中,对动物生长性能、免疫性能、生殖性能都有一定的影响,是一种新型的饲料添加剂,但是ISO对动物生产性能的影响有双面作用,这取决于其基础日粮、ISO的添加时期、ISO化合物的结构、ISO的主要成分、ISO在日粮中的添加量、持续时间,也和动物个体的新陈代谢、动物体内的雌激素水平有关。本试验主要研究20mg/kg大豆异黄酮的添加量对蛋鸡免疫性能、抗氧化性能及生长性能的影响,为深入探讨大豆异黄酮对蛋鸡生产性能的作用机制提供依据,且为其作为饲料添加剂在动物生产中应用提供理论基础。 本研究选取60只1日龄健康的蛋鸡,随机平均分为2组：试验组(E组)日粮中添加大豆异黄酮提取物20mg/kg,对照组(C组)饲喂基础日粮,分别在7、14、21、28、35日龄随机抽取E组和C组蛋鸡各5只,称重后分别心脏采血,把血.液分装于三支EP管中,一支抗凝血制备淋巴细胞悬液,用流式细胞术测定其中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群百分率,一支离心分离血清冷冻保存,用间接ELISA法测定其中IgG、IgM含量；用双抗体夹心法测定血清中IL-2、TNF-α的含量；一支用TBA法测定其中MDA和SOD含量。分别取气管液、肠液、胆汁冷冻保存,用间接ELISA法测定其中IgG、IgM含量；分别取胸腺、脾脏、法氏囊称重,脾脏研磨制成淋巴细胞悬液,用流式细胞术测定其CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群百分率；取肝脏-80℃冷冻保存,分别用TBA法和羟胺法测定MDA和SOD的含量；分别取十二指肠、空肠、同肠、盲肠固定于10%的福尔马林溶液中,制作石蜡切片及HE染色,显微成像系统测定十二指肠、空肠、回肠的绒毛长度、隐窝深度和肌层厚度及盲肠的皱襞高度、隐窝深度和肌层厚度。试验结果如下： 1、免疫器官指数结果显示：与对照组相比,从7～35日龄,试验组蛋鸡的法氏囊指数、胸腺指数、脾脏指数均有不同程度的增高,但无0.05水平统计学差异性。表明大豆异黄酮可以促进蛋鸡免疫器官发育。 2、外周血和脾脏中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群百分率结果显示：与对照组相比,从7～35日龄,外周血和脾脏的CD3+、CD4+含量及CD4+/CD8+比值都有所增加,但差异都不显著,表明大豆异黄酮对蛋鸡细胞免疫功能有所增强。 3、气管液、肠液、胆汁中IgG、IgM含量结果显示：与对照组相比,从7～35日龄,试验组气管液、胆汁、肠液的IgG、IgM含量都有提高。气管液中IgG含量在28日龄差异显著(p<0.05),IgM含量在7、14、28、35日龄差异显著(p<0.05)：肠液中IgG含量在14、28日龄差异显著(p<0.05),IgM含量在7日龄差异显著(p<0.05)。胆汁中IgM含量在7日龄差异显著(p<0.05)。表明在血清和黏膜免疫系统中,ISO对试验组蛋鸡体液免疫功能有所提高。 4、血清中IgG、IgM、IL-2、TNF-α含量显示：与对照组相比,从7-35日龄,试验组血清的IgG、IgM、IL-2、TNF-α含量都有增加,但是IgG、IgM差异都不显著；IL-2含量在14日龄与对照组差异显著(p<0.05、TNF-α含量在7d、14d、21d、35d与对照组差异显著(p<0.05)。表明ISO能提高蛋鸡体液免疫和细胞免疫功能。 5、分别用TBA法和羟胺法测定血清和肝脏中MDA和SOD含量结果显示：从7-35d,血清、肝脏中MDA含量都低于对照组,差异不显著(p>0.05),血清和肝脏中SOD含量都高于对照组,差异不显著(p>0.05),表明大豆异黄酮可以通过提高SOD酶活性和降低MDA含量,从生成和消除两个方面降低体内自由基,一定程度上提高蛋鸡的抗氧化能力。 6、石蜡切片及HE染色结果显示：随着日龄(14-35)的增长,E组蛋鸡十二指肠、空肠和回肠的绒毛长度、肌层厚度和V/C值都有低于C组蛋鸡的趋势,说明20mg/kg的大豆异黄酮提取物的添加量减缓蛋鸡的小肠肠道黏膜发育。E组蛋鸡盲肠的皱襞高度和肌层厚度整体高于同日龄C组蛋鸡,表明20mg/kg的大豆异黄酮提取物的添加量可以增加盲肠功能,从而促进粪便的排出。 这些结果表明，大豆异黄酮有提高蛋鸡的细胞免疫、体液免疫、抗氧化的功能,但减缓蛋鸡的小肠肠道黏膜发育。