治伤胶囊治疗类风湿性关节炎的实验研究

目的:采用佐剂性关节炎（AA）大鼠模型,以大鼠足跖原发性肿胀度、继发性肿胀度、关节炎指数、胸腺系数、脾脏系数、T细胞亚群CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平、血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）水平、血液流变学等指标为研究对象,探讨治伤胶囊对类风湿性关节炎的治疗作用及其作用机制。 方法:SD大鼠,76只,随机分为6组:正常组10只、模型组18只、阳性组、治伤胶囊大剂量组、治伤胶囊中剂量组、治伤胶囊小剂量组各12只。除正常组外其余各组大鼠左足跖皮内注射佐剂致炎,形成佐剂性关节炎大鼠模型,致炎前和致炎后2h、5h、8h、12h、24h、31h、48h和72h分别测量左后足踝部周径,其中致炎30min前和致炎后8h、22h、32h、46h和56h分别给药一次,正常组和模型组灌胃给予蒸馏水20ml/kg,阳性组给予雷公藤多苷片40mg/kg,治伤胶囊大、中、小剂量组分别给予治伤胶囊0.54 g/kg、0.27 g/kg和0.135 g/kg。然后停药至第17天观察继发性病变情况,记录关节炎指数,第17天（即治疗第1天）开始再继续给药,每天1次,剂量同上;每2天按上述方法测量右后足踝部周径及观察大鼠继发性病变情况。致炎后第28天全部大鼠股动脉放血致死,解剖取胸腺和脾脏称重,计算脏器系数。取约2-3 ml全血置于肝素抗凝管中,一部分用于血液流变仪检测血液流变学指标,另一部分用于流式细胞仪检测T细胞亚群CD4+、CD8+水平;其余血液分离血清,采用双抗体夹心ABC法-ELISA,行血清TNF-α、IL-1β水平检测。 结果: 1.原发性足跖肿胀:注射佐剂后模型组大鼠左后足跖逐渐肿胀,于造模后第12 h达到高峰,随后肿胀度开始下降。各用药组也呈相应的趋势,但肿胀度与模型组相比存在一定的差异,特别是在注射后31 h,治伤胶囊大、中、小剂量组对大鼠左后足跖的肿胀均有明显的抑制作用（P＜0.01）。 2.继发性足跖肿胀:与模型组相比,各用药组对大鼠右后足跖的肿胀度均有不同程度的抑制作用,其中,阳性组除了在治疗第10天无显著性差异外,其余肿胀度均小于模型组,有显著性差异（P＜0.05）;治伤胶囊大剂量组除了治疗第4天肿胀度与模型组有差异（P＜0.05）外,其余时段均无差异（P＞0.05）;治伤胶囊中剂量组肿胀度与模型组相比有显著性差异（P＜0.05,其中治疗第4、8、12天P＜0.01）;治伤胶囊小剂量组肿胀度在治疗过程中与模型组相比,有显著性差异（P＜0.01）。 3.关节炎指数:与模型组相比,治伤胶囊大剂量组除了治疗第4天有差异外（P＜0.05）,其余时段均无差异（P＞0.05）;中剂量组除了治疗第6天无差异外,其余时段的关节炎指数都明显低于模型组（P＜0.01）;小剂量组在治疗过程中,各时段的关节炎指数均明显低于模型组（P＜0.01）。 4.脾脏系数、胸腺系数:与模型组相比,阳性组和治伤胶囊大、中剂量组脾脏系数、胸腺系数明显减小,有显著性差异（P＜0.01）,治伤胶囊小剂量组也有一定程度的减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。 5.血液T细胞亚群CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平:与模型组相比,阳性组、治伤胶囊大、中、小剂量组CD4+水平有明显下降（P＜0.05）;阳性组、治伤胶囊大剂量组CD8+水平上升,有显著性差异（P＜0.05）;阳性组、治伤胶囊大、中、小剂量组CD4+/CD8+水平明显下降（P＜0.01）。 6.血清TNF-α、IL-1β水平:与模型组相比,阳性组和治伤胶囊大、中、小剂量组血清TNF-α水平均明显下降（P＜0.01）;阳性组和治伤胶囊大、中、小剂量组血清IL-1β水平也明显下降（P＜0.01）。 7.血液流变学指标:模型组大鼠全血低切、中切、高切及卡松粘度均明显高于正常组,有显著性差异（P＜0.01）;与模型组相比,治伤胶囊小剂量组全血低切、中切、高切指标有一定程度的下降,差异有统计学意义（P＜0.05）,其他用药组均无显著性差异（P＞0.05）;卡松粘度无显著性差异（P＞0.05）。 与正常组相比,模型组的红细胞计数和红细胞压积均上升,有显著性差异（P＜0.05）,红细胞聚集指数无显著性差异（P＞0.05）;与模型组相比,治伤胶囊小剂量组红细胞计数和红细胞压积有一定程度的下降,有显著性差异（P＜0.05）,其余各用药组均无显著性差异（P＞0.05）。 结论:治伤胶囊对佐剂性类风湿性关节炎模型大鼠足跖原发性肿胀、继发性肿胀及关节炎指数有一定的抑制作用;能降低类风湿性关节炎模型大鼠胸腺系数、脾脏系数;能调节类风湿性关节炎模型大鼠异常的T细胞亚群CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平;对类风湿性关节炎模型大鼠异常升高的血清TNF-α、IL-1β水平具有显著的降低作用;对类风湿性关节炎模型大鼠血液流变学具有一定的改善作用。治伤胶囊对类风湿性关节炎模型大鼠具有一定的治疗作用。