金雀异黄酮诱导HepG2细胞葡萄糖醛酸转移酶的表达

目的：金雀异黄酮(Genistein，Gs)是一种具有多种药理学作用的植物雌激素；研究发现它能通过激活核受体而调节多种药物代谢酶的表达。尿二苷葡萄糖醛酸转移酶(UGT)是生物体内最重要的Ⅱ相药物代谢酶，它能代谢许多种内外源性物质。本课题的研究目的是探讨Gs对人肝癌HepG2细胞株UGT1A、UGT2B及其它们的同工型酶的诱导作用及其机制。 方法：将HepG2细胞分成6组，即空白组、阳性对照组及四个Gs浓度组(1-10μM)；分别于加药后12h、24h及36h收集细胞。提取总RNA用半定量RT-PCR分别检测PPARα、UGT1A及其同工型UGT1A1和UGT1A9、UGT2B及其同工型UGT284mRNA的表达；提取微粒体蛋白用Western印迹检测UGT1A蛋白表达。 结果：(1)在实验剂量下，Gs在给药后12-36h对UGT1A1及UGT2BmRNA仅有轻微的诱导作用，与空白对照组相比没有发现显著性差异。Gs在12h时对UGT1A及UGT1A9mRNA的上调作用最明显，与空白组的差异有统计学意义(P＜0.05)；另外，此时UGT1AmRNA表达量与Gs剂量呈显著正相关(r=0.781，P=0.01)。Gs在24h对PPARα及UGT284mRNA的诱导作用最显著，差异具有统计学意义。此外，在12-36h期间，PPARα及UGT284mRNA表达量与Gs剂量呈显著正相关。(2)Gs在12-36h能上调UGT1A蛋白的表达，但在24h时作用最显著，有统计学意义。(3)PPARαmRNA与UGT1A9mRNA表达量无相关性(P＞0.05)，与UGT284mRNA量呈显著正相关(r=0.568，P＜0.01)。 结论：(1)1-10μM的Gs能诱导PPARα、UGT284、UGT1A及其同工型UGT1A9mRNA表达，并能增加UGT1A蛋白表达。(2)PPARα可能在Gs对UGT2B4表达调节中的作用明显，即Gs可能通过激活PPARα而上调UGT2B4的表达，而PPARα在Gs对UGT1A9表达调节中的作用相对较小，表明其他调节因子参与了此过程。