影响奶牛初乳中低丰度乳蛋白表达的因素研究

本研究以分析奶牛初乳中乳蛋白表达模式及提高低丰度乳蛋白表达量为目的,通过三个试验系统研究了泌乳日龄、胎次及维生素三个因素对奶牛初乳中乳清蛋白及乳蛋白表达模式的影响,为揭示乳蛋白的分泌机理、婴儿奶粉的配方设计、初乳粉生产时原料乳的选取及犊牛初乳饲喂制度的制定提供理论依据。 第一部分:利用蛋白质组学方法研究了泌乳日龄对奶牛初乳中乳清蛋白表达的影响。2-DE方法分离了产后第1天、第3天、第7天和第21天的乳清蛋白,利用ImageMaster软件找出不同采样时间点间差异表达的蛋白,然后用高效液相色谱串联质谱对差异表达蛋白进行鉴定。结果发现:与第1天的乳清蛋白表达模式相比,第3天与第1天的基本相同,只有免疫球蛋白G表达量下调;而到了第7天,有4个蛋白的表达下调;第21天的与第7天的没有差异。这些差异蛋白涉及具有免疫活性的免疫球蛋白G、M和乳铁蛋白以及具有运输功能的白蛋白。这些发现为揭示乳蛋白分泌机理及婴儿奶粉的配方设计、初乳粉生产原料乳的选取及犊牛初乳饲喂制度的制定提供理论依据。 第二部分:利用二向电泳(2-DE)结合高效液相色谱串联质谱方法研究了胎次对奶牛初乳中乳蛋白表达的影响。分别在产后第1天和第21天,采集第一胎和第三胎两个胎次的乳样。然后用2-DE方法分离乳蛋白,用ImageMaster软件找出两胎次在同一采样时间点的差异表达蛋白,再用高效液相色谱串联质谱对差异表达蛋白进行鉴定。结果发现:与初产奶牛的第1天乳蛋白表达谱相比,第三胎奶牛第1天所分泌的乳中有4个蛋白表达量上调;而第21天时两个胎次乳蛋白的表达无差异。这些差异蛋白包括免疫球蛋白G、M、乳铁蛋白以及白蛋白。这些发现为揭示胎次和泌乳日龄对乳蛋白分泌的影响机制提供理论基础。 第三部分:利用蛋白质组学方法研究了产前给奶牛补充维生素AD3E (V-AD3E)对奶牛初乳中乳蛋白表达的影响。在预产期前15天,给奶牛注射V-AD3E,分别在产后第1天和第21天,采集注射组和对照组的乳样。然后用2-DE方法分离乳蛋白,用ImageMaster软件找出两组在同一采样时间点的差异表达蛋白,再用高效液相色谱串联质谱对差异表达蛋白进行鉴定。结果发现:与对照组的第1天乳蛋白表达谱相比,注射组的第1天乳蛋白表达谱上有2个蛋白表达量上调;而第21天时两组乳蛋白的表达无差异。这两个差异蛋白包括具有运输功能的白蛋白以及具有免疫活性的免疫球蛋白G。这些发现为提高初乳中生理活性物质含量提供了有利参考。