分子标记在侧耳属菌株分类中的应用

本研究是在形态学观察的基础上,利用了重复序列间区DNA标记和随机扩增多态性DNA标记等技术,研究了侧耳属的22个菌株和一株双孢蘑菇菌株的系统发育关系。 实验的结果可以归纳为以下三个方面: 1 菌丝体和子实体形态特征的观察结果表明:双孢蘑菇与侧耳属菌株形态特征明显不同,分别位于不同的属。鲍鱼菇与侧耳属其他菌株形态特征区别较大,单独构成一种。16号秀珍菇和凤尾菇形态特征十分相似,两者应为一个种。而其它菌株与糙皮侧耳、佛罗里达侧耳近似。 2.供试菌株RAPD标记的研究结果:使用S系列随机引物筛选后的的7条引物S22、S23、S30、S61、S62、S78、S79对供试菌株的基因组DNA进行PCR扩增,共获得478条带。聚类分析结果显示:在0.71水平上将侧耳属菌株分八组,第Ⅰ组:1号、2号、3号糙皮侧耳、栎侧耳、13号和14号佛罗里达侧耳、台湾秀珍菇;第Ⅱ组:15号秀珍菇、日本秀珍菇、美味侧耳;第Ⅲ组:平802;第Ⅳ组:阿魏蘑、白阿魏蘑、杂交阿魏蘑;第Ⅴ组:黄白侧耳、小白平菇、华平97;第Ⅵ组:凤尾菇、16号秀珍菇;第Ⅷ组:平科大杂优、平8804;第Ⅷ组:鲍鱼菇。 3.供试菌株ISSR标记的研究结果:ISSR引物在23个菌株上扩增共得到120条带。由相似系数聚类结果可以在0.71水平将侧耳属菌株分为四组:4号阿魏蘑,5号白阿魏蘑,6号杂交阿魏蘑位于第Ⅱ组;凤尾菇,16号秀珍菇位于第Ⅲ组;鲍鱼菇位于第Ⅳ组;其他供试菌株位于第Ⅰ组。同时利用引物P1对日本秀珍菇扩增,得到了一条约1.3Kb片断,经克隆和测序分析,验证了重复序列（TATG）_n的存在。 基于侧耳属菌株的形态特征、ISSR和RAPD标记的结果,分析后我们可以得到以下结论: 1 鲍鱼菇单独作为一个种,与其他侧耳属的种遗传距离较远。 2 1号和3号糙皮侧耳间、13和14号佛罗里达侧耳间几乎无差异,而且它们的关系很近,由此认为四者是同种而冠以不同名称的菌株。 3 凤尾菇和16号秀珍菇无论是形态特征还是分子分类结果都显示很近的亲缘关系,所以认为两者是一个种的不同名称。 4 形态特征相似的一些菌株,例如阿魏蘑、白阿魏蘑和杂交阿魏蘑使用分子标