药物干预对先天高血糖小鼠肠道菌群的影响

随着人们生活水平的提高,肥胖、2型糖尿病的发病率越来越高,严重威胁人类健康。肠道菌群与2型糖尿病的发生发展有紧密联系,这方面的研究已经成为社会和医学界关注的焦点。 本实验以自发性2型糖尿病KKAy小鼠和正常C57BL/6J小鼠为实验材料,运用PCR-DGGE、相似性统计、克隆条带测序、基因文库比对和系统发育分析等技术,对两种小鼠的肠道微生物菌群结构进行分析,统计结果表明：两种基因型小鼠肠道菌群结构有明显不同,相似性系数(Cs)只有26%-44%,而基因型相同的小鼠Cs为82%-100%。DGGE图谱上13个主要条带的克隆、测序结果进一步反映了两种基因型小鼠肠道菌群的区别。将所有的克隆序列在GenBank和RDP数据库中比对,并做系统发育树。我们寻找到一些与2型糖尿病有关的细菌,并且对它们的生理功能进行阐述。 对整个药物试验过程中5个时间点的小鼠粪便样品进行PCR-DGGE,通过肠道菌群多样性的变化和主成分分析研究药物作用对KKAy小鼠肠道菌群的影响。整个试验过程中,正常组和中药高剂量组小鼠的肠道菌群多样性保持在较高水平,并且都比较稳定；中药低剂量组菌群多样性高于模型对照组和吡格列酮组,吡格列酮组肠道菌群多样性下降最快。在主成分分析中,吡格列酮对肠道菌群的影响是单方向的,而益气化浊胶囊是多方向的。结果显示,益气化浊胶囊对肠道菌群的作用有别于吡格列酮,前者在维持肠道菌群多样性和改善肠道菌群结构方面更具有优势。 运用实时荧光定量PCR技术,对比不同时期各组小鼠肠道中拟杆菌和乳杆菌的数量。给药后30天,中药高、低剂量组小鼠肠道中拟杆菌数量下降,接近正常组水平,而模型对照组和吡格列酮组没有变化,仍然保持较高水平。整个实验期间,模型对照组乳杆菌数量下降,其他组明显上升。这说明益气化浊胶囊对拟杆菌数量有特殊的调节作用,而乳杆菌数量的增加可以缓解2型糖尿病病情。 肠道微生物隐藏着很多生物奥秘,需要我们运用更多更先进的技术进行研究。此外,鉴于益气化浊胶囊的特殊功效,我们相信中药辅助治疗2型糖尿病将会有更为广阔的应用前景和研究价值。