血清药理学方法研究藏药鲁堆多吉对雌性大鼠生殖系统的影响及作用机制

目的：本课题以藏药鲁堆多吉(藏党参)中的长花党参(Codonopsis thalictrifolia Wall. Var.mollis(Chipp)L.T.Shen)为研究对象,观察藏党参水提液对雌性SD大鼠生殖系统的影响,并用血清药理学方法研究藏党参含药血清对体外培养的卵巢颗粒细胞增殖分化及生理功能的影响,同时探究藏党参对卵巢颗粒细胞的作用机制。为临床使用藏党参治疗生殖系统疾病提供科学的实验数据。 方法：用藏党参水提液和潞党参水提液灌胃雌性SD大鼠持续两周,计量大鼠卵巢及子宫的重量变化；用放射免疫法检测大鼠血清中雌二醇(E2)和孕酮(P)的变化,用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化。 建立大鼠卵巢颗粒细胞体外培养方法,采用血清药理学方法研究藏党参含药血清和潞党参含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖分化及功能的影响,并通过阻断卵巢颗粒细胞的cAMP通路、Ca2+通道和细胞内蛋白质合成,对含药血清的作用机制进行初步探究。 结果：藏党参水提液和潞党参水提液灌胃大鼠两周后,雌性大鼠的卵巢重量降低(P<0.05)；同时大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)含量显著升高(p<0.05)；血清中谷胱甘肽(GSH)水平显著升高(P<0.05),丙二醛(MDA)的含量(P<0.05)显著降低。 在卵巢颗粒细胞体外培养实验中,通过台盼蓝排斥实验和雌二醇含量测定证明含药血清浓度为5%,含药血清与颗粒细胞共培养时间达到24h时,含药血清能够明显降低颗粒细胞的雌二醇含量(P<0.05),但不影响颗粒细胞的MTT吸光度值(P>0.05),3β-HSD含量(P＞0.05)和孕酮的分泌量(P>0.05)。cAMP通路的抑制剂H89能够逆转含药血清对颗粒细胞雌二醇分泌的抑制作川(P<0.05)。 结论：藏党参水提液中的药效成分具有清除雌性大鼠体内自由基的作用,其作用是通过提高大鼠血清中GSH含量、降低MDA水平而达到的。 藏党参含药血清可以抑制颗粒细胞分泌雌二醇,但对颗粒细胞的增殖分化无显著影响。 藏党参含药血清可通过cAMP言号传导途径来影响卵巢颗粒细胞雌二醇的分泌。