丹参为唇形科(Labiatae)鼠尾草属(Salvia)植物丹参(S. miltiorrhiza Bunge)的干燥根及根茎。丹参主要有两类化学成分：脂溶性丹参酮类化合物和水溶性酚酸类化合物。丹酚酸B是从丹参中分离出来的酚酸,对脑缺血引起的脑血管疾病有很好的保护作用,是多种丹参制剂的重要指标性成分之一。丹酚酸B不易透过血脑屏障,丹参素在组织中分布较快,且能通过血脑屏障。本文通过研究丹酚酸B代谢,丹酚酸B、丹参素体内行为学,比较二者之间的代谢规律及差别。同时建立体外血脑屏障模型,探讨丹酚酸B、丹参素穿透血脑屏障特点,并研究二者对PC-12细胞的保护作用,为丹参制剂的质量标准提供依据。
第一章绪论部分针对丹参酚酸化学成分、丹参酚酸ADME特性、药物穿透血脑屏障进行了系统的总结和分析。
第二章研究了丹酚酸B体内代谢规律,采用UPLC/Q-TOF技术分析鉴定大鼠尾静脉注射丹酚酸B后大鼠体内丹酚酸B的原型及其代谢产物,比较原型与代谢产物的结构差异。在血浆中共鉴定2个代谢产物,主要代谢产物途径为酯键断裂；在胆汁中共鉴定5个代谢产物,主要代谢途径为丹酚酸B酯键断裂,及断裂后甲基化,并首次检测到丹酚酸B在大鼠体内代谢为丹参素；在尿液中共鉴定4个代谢产物,主要代谢途径为甲基化及硫酸化。同时阐明了大鼠尾静脉注射丹酚酸B后在血浆、胆汁、尿液中主要代谢产物的之间的代谢途径,从而揭示了丹酚酸B在大鼠体内的变化规律,为丹酚酸B体内代谢研究提供科学依据。
第三章研究了丹酚酸B、丹参素体内药动学及其与不同血浆蛋白结合率,从药物体内行为的角度比较两者之间的差异。实验结果表明,注射等量丹酚酸B、丹参素,大鼠血浆中丹参素的生物利用度、最大血药浓度明显高于丹酚酸B,平均驻留时间、半衰期明显长于丹酚酸B。通过研究丹酚酸B、丹参素与不同血浆蛋白结合率,比较二者在体内分布行为的差异。实验结果表明,丹酚酸B和丹参素在3种血浆中的蛋白结合率不同,且不具有质量浓度依赖性。丹酚酸B与不同血浆的蛋白结合率明显高于丹参素,说明丹酚酸B在血浆中大部分呈结合状态存在,游离药物浓度低；丹参素的血浆蛋白结合率较低,其在血浆中大部分呈游离状态。
第四章通过建立体外血脑屏障模型,探讨丹酚酸B、丹参素穿透血脑屏障特性。实验结果得出,在血脑屏障的内侧分别给药丹参素、丹酚酸B后,能够在血脑屏障的外侧检测到丹参素,而未能检测到丹酚酸B。该结果提示,丹参素能够透过体外血脑屏障模型,丹酚酸B未能透过血脑屏障。
第五章采用大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)研究丹酚酸对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用并探讨其可能的作用机制。实验通过LDH漏出率,细胞内ROS含量来研究丹酚酸B、丹参素的保护作用机制。初步研究表明,丹酚酸B、丹参素可以明显降低谷氨酸诱导的PC12细胞损伤后LDH漏出率和细胞内ROS的堆积。
第六章对全文工作进行总结与展望。
