半夏泻心汤相关活性成分对胃溃疡大鼠TFF1、2mRNA表达的影响

目的:观察半夏泻心汤中5种活性成分（黄芩苷、小檗碱、甘草次酸、β-谷甾醇和人参总皂苷）及其配伍对乙酸性胃溃疡大鼠胃组织TFF1 mRNA、TFF2 mRNA表达水平的影响,探讨其抗溃疡、发挥粘膜保护作用的主次不同及成分的较佳组合。 方法:清洁SD雄性大鼠87只,体重180～220g,两次随机分为5组,即正常组（6只）、假手术组（6只）、模型组（6只）、奥美拉唑组（6只）、中药活性成分正交组（63只）,正交组按照正交表L16(215)设计,重复3次,除5种单味活性成分每组6只外,其余各组每组3只。采用大鼠胃腺近幽门处20%乙酸0.05ml浆膜下注射复制慢性胃溃疡模型,通过大体及组织学观察粘膜变化;游标卡尺测定溃疡面积;采用RT-PCR半定量的方法检测大鼠胃组织TFF1、TFF2 mRNA的表达;应用SPSS 13.0统计软件对实验数据进行统计分析。 结果: 1.模型复制:大体观察可见,20%乙酸0.05ml浆膜下注射溃疡成功率100%,表现为典型的胃溃疡特征,溃疡面积5～23mm2,对照组大鼠胃黏膜皱襞明显,色淡、无充血、无溃疡;光镜下,模型组可见侵犯粘膜全层,甚者深达肌层的坏死改变,并可见大量的炎性细胞,溃疡边缘粘膜腺体间质充血水肿,对照组粘膜结构完整,粘膜腺体排列整齐,未见明显炎性细胞浸润。 2.溃疡面积结果显示:与模型组比较,西药组、甘草次酸组、β-谷甾醇组、小檗碱组及黄芩苷组溃疡面积明显减小（P＜0.01）,上述各活性成分组与西药组比较未见差异（P＞0.05）;在交互作用中,β-谷甾醇联合小檗碱促溃疡愈合作用明显（P＜0.05）,而黄芩苷联合人参总皂苷则出现相反的抑制作用（P＜0.05）。 3.TFF1 mRNA表达结果显示:与模型组相比,甘草次酸组、β-谷甾醇组、西药组能提高其表达水平（P＜0.05）,三者之间差异不大（P＞0.05）;在交互作用中,小檗碱联合人参总皂苷能显著促进其表达（P＜0.05）,其余各组促表达作用不明显。 4.TFF2 mRNA表达结果显示:与模型组相比,甘草次酸组、β-谷甾醇组TFF2基因表达水平虽有所升高,但尚未达到统计学意义要求（P＞0.05）;而交互列中,甘草次酸与β-谷甾醇配伍能增强其表达（P＜0.05）。 结论: 1.通过大体、组织标本证实大鼠胃腺近幽门处前壁浆膜下注射20%乙酸0.05ml复制胃溃疡模型,既有典型的溃疡形态,又不出现穿孔,模型成功。 2.乙酸致慢性胃溃疡大鼠,TFF1、TFF2基因表达较正常水平升高,可能是胃黏膜本身防御和修复损伤的作用机制之一。 3.单味活性成分中,小檗碱、甘草次酸、β-谷甾醇抗溃疡作用最为明显,能显著减小溃疡面积,并升高大鼠胃组织TFF1、TFF2 mRNA表达水平,推断可能通过增加后者的表达量而发挥抗溃疡作用。 4.活性成分配伍发现,β-谷甾醇联合小檗碱应用明显减小溃疡面积,促进溃疡愈合;小檗碱联合人参总皂苷、甘草次酸联合人参总皂苷应用均能显著促进TFF1基因的表达;甘草次酸与β-谷甾醇配伍使TFF2基因表达上调,发挥抗溃疡作用。 5.综合分析发现:甘草次酸与β-谷甾醇联合应用后能有效减小溃疡面积,同时升高TFF1、2mRNA的表达水平,由此推测二者通过增加三叶因子的表达发挥抗溃疡作用,促进溃疡愈合。