红毛五加多糖的分离纯化与理化性质研究

本文从中药红毛五加中分离纯化了三种多糖,并对它们的理化性质进行了研究。红毛五加经热水浸提,用Sevag法脱蛋白,乙醇沉淀,得到粗多糖。粗多糖经DEAE-cellulose 32离子交换层析和Sephacryl S-200 HR凝胶层析进一步纯化得到三个主要多糖组分:AHP-Ⅰ、AHP-Ⅱ和AHP-Ⅲ。三种多糖经HPLC、琼脂糖电泳和紫外光谱等方法检测,证明均为不含蛋白、核酸的均一组分。 HPLC测定AHP-Ⅰ、AHP-Ⅱ和AHP-Ⅲ的表观分子质量分别为7.0 kD、59.5 kD和12.9 kD;Sephacryl S-300凝胶层析也得到相似结果。纸层析和GC结果综合分析得知,AHP-Ⅰ含有阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,它们之间的摩尔比为1.00:1.40:0.64:3.13:2.09;AHP-Ⅱ含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为0.36:1.00:0.15:0.20:1.10;AHP-Ⅲ-含有鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为1.22:1.00:0.40:0.28:0.26:1.03。AHP-Ⅱ、AHP-Ⅲ中含有糖醛酸,用咔唑-硫酸法测得糖醛酸含量分别为6.7%和6.0%;AHP-Ⅰ不含糖醛酸。 紫外光谱显示,它们的最大紫外吸收峰具有随糖浓度的降低向低波长漂移的现象。三种多糖的红外光谱显示,在1420 cm-1,2800～2900 cm-1,3100～3500cm-1均具有多糖的特征吸收峰。同时AHP-Ⅱ和AHP-Ⅲ在1730 cm-1附近具有-COOH的特征吸收峰。通过对核磁共振图谱的解析进一步证实的三种多糖为β糖苷键连接的杂多糖。