L-精氨酸对热应激大鼠胸腺细胞凋亡影响的实验研究

目的：探讨热应激对大鼠胸腺及其细胞的影响和L-精氨酸 （L-Arg）对胸腺的作用。 方法：将SD大鼠分为不同高温处理组和常温对照组，通过 灌胃补充不同剂量L-Arg，在热应激前、后分别测量各组大鼠的 体重、胸腺指数、脾脏指数、呼吸和肛温等生理指标，并利用光 镜技术、电镜技术、凝胶电泳技术、FCM和体视学定量分析技术， 探讨L-Arg对热应激大鼠胸腺细胞凋亡的影响。 结果：1、常温下，胸腺细胞结构清晰，形态规则，自然凋 亡率低，补充L-Arg组的自然凋亡率低于灌水对照组（析因分析 显示，组间比较，下同，P＜0.001）。而不同温度的热应激均可导 致胸腺细胞凋亡，电镜和光镜显示其典型的形态学特征，DNA凝 胶电泳呈“梯状”条带，FCM检测出现凋亡峰，但补充L-Arg两 组轻于灌水对照组，而且，热应激后2h便可见凋亡细胞，4～8h 达高峰，随后下降，24h后补充L-Arg组基本恢复到正常水平， 灌水对照组稍差。细胞周期分析发现，S期和G2/M期细胞数量 的变化基本上和凋亡率的变化相一致，G0/G1期细胞数量的变化 则相反。 2、大鼠胸腺指数和脾脏指数，热应激组明显低于常温对照 组（P＜0.05），灌水对照组低于补充L-Arg两组，但补充L-Arg 两组间无显著性差异（P＞0.05），并且两指数的变化具有温度和 热应激后时间依赖性。 3、常温下，补充0.5g L-Arg/kg.bw组大鼠体重增加高于 灌水对照组（P＜0.05），而补充L-Arg两组之间无显著性差异 吓＞0．05人 热应激后，同一温度各组大鼠体重下降无显著性差 异 吓＞0．0引，但体重下降与不同温度热应激有关（P＜0．0引。 4、常温和热应激下，各组大鼠呼吸和肛温的变化均无显著 性差异（P＞0刀5）。 5、体视学定量分析显示：热应激大鼠胸腺细胞线粒体体密 度、形状因子明显增加，表面积与体积比降低；细胞核核浆比。 表面积密度减小，表面积与体积比增大。而补充L－Arg具有减轻 上述体视学参数变化的作用。 结论：1、综合利用光镜、电镜、DNA凝胶电泳、FCM 以及 体视学定量分析技术测定热应激条件下大鼠胸腺细胞凋亡，既灵 敏、特异，又可定性、定量。 2、不同温度的热应激均可诱导大鼠胸腺细胞凋亡，且具有 温度和热应激后时间依赖性。 3、补充适量的L－Arg对热应激大鼠胸腺有较好的保护作用， 可减少胸腺细胞凋亡率和减轻胸腺细胞的损伤，减轻热应激时胸 腺和脾脏的萎缩，但对热应激大鼠体重、呼吸、肛温等影响不大。 4、常温下，补充适量的L－Arr可使大鼠体重、胸腺指数和 脾脏指数增加，对呼吸和肛温的影响不十分明显。