没食子单体化合物分离鉴定及其药理活性研究

没食子为没食子蜂科(瘿蜂科)昆虫没食子蜂(Cynips gallae-tinctoriae Olivier)的幼虫,寄生于壳斗科植物没食子树( Quercus infectoria Olivier)幼枝上产生的虫瘿。没食子药用历史悠久,为维吾尔医常用药,具有固气,涩精,敛肺,止血之功效。本实验室前期研究表明,其粗提物具有较强的体外抑菌功能。本文在综述没食子化学成分及药理活性的研究进展基础上,对没食子的化学成分进行了系统研究,并对部分单体化合物进行药理活性实验。从没食子95%乙醇冷浸液中通过溶剂回流提取法及各种色谱分离手段(硅胶柱层析, TLC, Sephadex LH-20,ODS, MCI, HPLC)提取分离得到了12个化合物,通过1H-NMR、13C-NMR,HMQC、HMBC等波谱方法对其中9个化合物的结构进行鉴定,确定其结构分别为:没食子酸(1);间-二没食子酸(2);对-二没食子酸(3);没食子酸甲酯(4);没食子酸乙酯(5);1, 2, 3, 6-四-0-没食子酰基-β-D-葡萄糖( 6);1, 2, 3, 4, 6-五-0-没食子酰基-β-D-葡萄糖(7);1-O-没食子酰基- O-β-D-葡萄糖(8);1,6-二-0-没食子酰基- O-β-D-葡萄糖(9)。其中化合物对-二没食子酸(3)、没食子酸乙酯(5)、1-O-没食子酰基- O-β-D-葡萄糖(8)和1,6-二-0-没食子酰基- O-β-D-葡萄糖(9)均为首次从该植物中分离得到。对没食子化合物1, 2, 3, 6-四-0-没食子酰基-β-D-葡萄糖、没食子酸乙酯、没食子酸、没食子酸甲酯的部分药理活性进行了研究,结果表明:4种化合物对4种革兰氏阳性菌、3种革兰氏阴性菌和真菌白色念珠菌(ATCC10231)菌均具有体外抑菌活性,抑菌浓度为7.27-29.09μg/mL,其中化合物没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯对金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)、仔猪副伤寒沙门氏菌(S.C 500)具有较强的抑菌活性,最小抑菌浓度为7.27μg/mL; 4种化合物对小鼠骨髓瘤SP2/0癌细胞具有较强的体外抗癌活性。细胞生长明显受到抑制,抑制作用呈浓度依赖关系,化合物1,4,5,6其IC50分别为:1.838mg/mL、1.221mg/mL、3.658mg/mL、3.035mg/mL;急性毒性试验结果表明没食子化合物没食子酸、没食子酸乙酯、1, 2, 3, 6-四-0-没食子酰基-β-D-葡萄糖LD50值无法做出,其最大安全耐受量倍数为137、151、157,相当于成人常用量的(0. 08g/kg·d - 1) 100倍以上,该剂量认为是安全可行的。没食子酸甲酯其半数致死剂量LD50为1.9004(g/kg), LD50可信限为1.821±1.984(g/kg),LD50的平均可信限为(1.9004±0.0815) g/kg,表明该化合物略有毒性,临床应用时要注意其毒性,其毒性机理有待进一步研究。