艾烟冷凝物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的活性研究

目的：本实验将运用国内外较为公认的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383来研究外界刺激物对机体呼吸系统的影响,通过观察艾烟冷凝物(艾烟烟气生成物)对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的增殖、细胞吞噬功能以及细胞活性氧的影响,进而探讨艾烟冷凝物对体外培养细胞NR8383的活性,其对NR8383细胞是否具有一定的毒性作用,从而为评价艾灸的安全性提供一定的实验依据。方法：在细胞增殖实验中,将艾烟冷凝物染毒浓度分别设计为0mg/ml、0.004mg/ml0.008mg/ml、0.012mg/ml、0.016mg/ml、0.020mg/ml,以上述不同浓度的艾烟冷凝物对NR8383进行细胞染毒,染毒时间分别为12h、24h、36h、48h,然后采用CCK-8方法对细胞增殖情况进行检测；吞噬功能实验中,艾烟冷凝物染毒浓度设计同上,对NR8383进行细胞染毒24h后,采用流式细胞仪检测吞噬率；活性氧实验中,艾烟冷凝物浓度分别为0mg/ml、0.008mg/ml、0.016mg/ml、0.024mg/ml、0.032mg/ml、0.040mg/ml,以上述不同浓度的艾烟冷凝物对NR8383进行细胞染毒,染毒时间为24h,采用流式细胞仪检测细胞活性氧。结果：艾烟冷凝物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞进行染毒12h后,各实验组的细胞存活率虽都高于空白对照组,但各实验组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。染毒24h、36h后,实验组浓度为0.004mg/ml、0.008mg/ml、0.012mg/ml、0.016mg/ml时,各组细胞存活率不仅高于空白对照组,且各实验组与空白对照组差异有统计学意义(P<0.05),实验组浓度为0.020mg/ml时,其存活率虽低于空白对照组,但与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。染毒48h后,除浓度为0.008mg/ml的实验组外,其余各组细胞存活率与空白对照组差异有统计学意义(P<0.05)。艾烟冷凝物对NR8383细胞分别进行染毒12h、24h、36h、48h后,NR8383细胞存活率随着艾烟冷凝物浓度的升高均呈现先增加后降低的趋势,艾烟冷凝物对NR8383细胞的作用存在着一定的浓度效应。且随着作用时间的延长,细胞存活率亦随着艾烟冷凝物浓度的增高而先增加后降低,其对NR8383细胞的作用存在着一定的时间效应。艾烟冷凝物对NR8383细胞分别进行染毒24h后,NR8383细胞的吞噬功能随着艾烟冷凝物浓度的升高而增强。除浓度为0.004mg/ml的实验组外,其他各组与空白对照组差异均有统计学意义(P<0.005,校正卡方值)。艾烟冷凝物对NR8383细胞分别进行染毒24h后,NR8383细胞的活性氧随着艾烟冷凝物浓度的升高而降低。各实验组与空白对照组差异均有统计学意义(P<0.001)。 结论：1、艾烟冷凝物对NR8383细胞的增殖存在着一定的浓度效应和时间效应。在实验所设计的染毒时间上,NR8383细胞均随着艾烟冷凝物浓度的升高呈现出了先增加后降低的趋势,且随着染毒时间的不断延长,NR8383细胞的存活率亦随着艾烟冷凝物浓度的增高而先增加后降低。 2、艾烟冷凝物可以提高大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的吞噬功能,并呈现出一定的浓度效应。艾烟冷凝物对NR8383细胞分别进行染毒24h后,NR8383细胞的吞噬功能随着艾烟冷凝物浓度的升高而呈现出增强的趋势。 3、艾烟冷凝物可以降低大鼠肺泡巨噬细胞NR8384的ROS,并呈现出一定的浓度效应。艾烟冷凝物对NR8383细胞分别进行染毒24h后,NR8383细胞的ROS随着艾烟冷凝物浓度的升高而呈现出降低的趋势。