天然食品因子菊苣酸体内生物利用特征及组织分布研究

菊苣酸（Chicoric acid）属咖啡酸类衍生物,广泛分布于紫锥菊、莴苣及卷心菜等可食用的植物及蔬菜中。大量研究发现菊苣酸具有抗氧化、抗菌抗病毒、提高机体免疫力等生理活性,还具有干预肥胖和糖尿病等代谢疾病的潜力。菊苣酸生理活性多样,其作为食品功能因子开发潜力巨大,但目前鲜有菊苣酸在体内吸收代谢的相关研究。因此,本文采用HPLC-MS/MS研究菊苣酸在大鼠体内代谢动力学及组织分布,为明确菊苣酸在体内生物利用特征及其功能食品开发提供理论依据。主要研究结果如下:（1）采用单因素试验探究超声波辅助提取条件,利用制备高效液相色谱从紫锥菊中分离制备菊苣酸。试验得到提取条件为:60%乙醇提取剂、处理时间30 min、微波功率135W、处理温度40°C、料液比1:40。通过制备液相色谱分离收集,减压浓缩结合冷冻干燥得到干燥的菊苣酸单体,纯度为98.4%。（2）建立并验证HPLC-MS/MS检测大鼠生物样品中菊苣酸的方法。试验结果表明:菊苣酸和内标阿魏酸在保留时间内无内源性物质干扰;线性范围是50-2000ng/mL（R2>0.996）;定量限在7.43-20.57 ng/mL之间;日内精密度在2.13-8.06%之间,日间精密度在3.28-10.70%之间,且日内日间准确度均<15%;提取回收率在78.4%-113.6%之间;稳定性在76.4%-104.1%之间。（3）采用建立的检测方法研究菊苣酸在大鼠体内的代谢动力学:大鼠给予菊苣酸50mg/kg灌胃,于灌胃后10min、30 min、60 min、180 min、240 min、360 min、480 min、600min、720 min和1440 min于尾部静脉取血,采用WinNonlin软件进行分析,得到代谢动力学参数:浓度-时间曲线下面积（AUC）为1558.00±392.27mg min L-1,平均驻留时间（MRT）为1098.12±181.58min,体内半衰期（T1/2）为738.78±152.41min。（4）采用建立的检测方法研究菊苣酸在大鼠体内各组织分布及血浆蛋白结合率。大鼠给予菊苣酸50mg/kg灌胃,于灌胃后1、3、6h处死取出心、肝、脾、肺、肾、脑,测定组织中菊苣酸含量,结果表明,各组织最高浓度依次为:肝>肺>肾>心>脾>脑;利用超滤法测定人、牛、大鼠血浆蛋白结合率均超过96.9%。综上所述,试验探究了紫锥菊中菊苣酸提取条件;建立并验证了HPLC-MS/MS检测大鼠生物样品中菊苣酸的方法,该方法无内源性物质干扰,专属性、线性、日内日间精密度及准确度、灵敏度、回收率及稳定性均良好;菊苣酸能较快分布至各组织中,并能通过血脑屏障;菊苣酸与血浆蛋白结合率高,其在体内消除速率慢,平均驻留时间长。