菊花提取物抑制小鼠高脂性脂肪肝形成及其机制研究

目的：研究菊花提取物对小鼠高脂性脂肪肝形成的抑制作用及其可能机制。 方法：体内实验采用雄性小鼠，将小鼠随机分为正常对照组、模型组、菊花提取物75、150、300mg/kg组及力平之40mg/kg组。小鼠在以高脂乳剂复制高脂性脂肪肝模型的同时，给予相应的药物6周后，取肝脏和血液，用比色法测定肝和血中的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和游离脂肪酸（FFA），以及肝中的超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量；用光镜观察肝脏的脂肪变性程度；用RT-PCR和Western blot方法，检测肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）α、固醇调节元件结合蛋白（SREBP）-1c、脂肪酸合酶（FAS）、二脂酰甘油酰基转移酶（DGAT）、脂蛋白脂酶（LPL）和胆固醇7α羟化酶（CYP7A1）mRNA和蛋白表达的情况。体外实验用BRL大鼠肝细胞株，采用含药血清方法观测菊花提取物对培养细胞内TC、TG和FFA含量以及PPARα、SREBP-1c、FAS、LPL和CYP7A1蛋白表达的影响。为了进一步明确菊花提取物的调脂作用是否与PPARα介导有关，先以PPARα抑制剂(1μmol/LMK886)预处理BRL肝细胞2h后，观察对SREBP-1c、FAS和LPL蛋白表达的影响。 结果：在给予菊花提取物75-300mg/kg6周后，肝组织中的TC、TG、MDA含量和肝重系数降低（P<0.05或P<0.01），血中的TC和TG也有一定的降低，而肝中的SOD升高（P<0.01），但肝组织中的FFA含量未见有明显变化。菊花提取物可使小鼠肝组织脂肪变性的程度明显减轻。RT-PCR和Western blot检测结果显示，菊花提取物可下调肝中的SREBP-1c和FAS表达，上调LPL、CYP7A1和PPARα的表达（P<0.05或P<0.01），但DGAT的表达未见明显变化。在体外培养的BRL肝细胞上，菊花提取物含药血清也可剂量依赖地降低细胞内TC、TG和FFA的含量，下调SREBP-1c和FAS的蛋白表达，上调LPL和PPARα的蛋白表达（P<0.05或P<0.01），在预先使用PPARα抑制剂MK886后，菊花提取物对SREBP-1c、FAS和LPL蛋白表达的影响被减弱或完全取消。 结论：菊花提取物可以抑制小鼠高脂性脂肪肝的形成，其作用机制可能与通过增加肝中的PPARα表达后，调节与脂代谢相关靶基因SREBP-1c、FAS、LPL和CYP7A1的表达以及增加肝脏的抗氧化作用有关。