梓醇预处理对大鼠缺血再灌注心肌保护作用的研究

目的 研究不同剂量梓醇预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用,并初步探讨其作用机制。 方法 将54只SD大鼠随机分成5组:空白对照组(n=6)、缺血再灌注组(I/R组,n=12)、梓醇低剂量组(1 mg/kg,n=12)、中剂量组(5 mg/kg,n=12)、高剂量组(10 mg/kg,n=12)。建立在体缺血再灌注损伤动物模型,结扎左冠状动脉前降支30 min,松解再灌注120 min。空白组仅穿线,不结扎。各用药组在制模前7天连续腹腔注射梓醇(1、5、10 mg/kg)1 ml,对照组及模型组注射等量生理盐水。测各组大鼠心肌梗死面积、心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,采用原位末端缺刻标记法(TUNEL)观察心肌细胞凋亡情况、用免疫组化法检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达。 结果 与空白对照组比较,I/R组及梓醇低、中、高剂量组心肌梗死面积明显增大,MDA含量、细胞凋亡指数(AI)及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01)。与I/R组比较,梓醇各剂量组梗死面积明显减小[(21.07±4.15,17.37±3.53,15.66±3.69 vs 31.70±5.29)%,P <0.01],中、高剂量组心肌SOD活性显著升高[(40.29±4.78,44.76±8.03 vs32.82±6.42)U/mg,P <0.05],各剂量组MDA含量显著降低[(1.47±0.04,1.14±0.10,0.97±0.06 vs 1.83±0.05)nmol/mg,P<0.01],中、高剂量组心肌细胞AI明显降低[(13.95±1.44,12.00±1.69 vs 16.05±2.00)%, P<0.05或P<0.01)],各剂量组Bcl-2蛋白表达显著增多[平均灰度值(138.32±6.93,134.01±6.08,122.56±4.71 vs 160.51±8.30),P<0.01],Bax蛋白表达减少[平均灰度值(141.14±7.07,157.66±7.15,165.63±6.37 vs 136.02±7.04), P<0.05或P<0.01],Bcl-2/Bax表达比值明显降低(P<0.01),中、高剂量组Caspase-3蛋白表达减少[平均灰度值(154.74±4.72,158.93±4.10 vs 146.43±3.80), P<0.01],且各指标呈剂量依赖型变化,剂量越高,作用越显著。 结论 1、梓醇预处理对缺血再灌注损伤的心肌有保护作用,呈量效关系。 2、梓醇发挥对缺血再灌注损伤心肌的保护作用的机制可能是通过抗氧化作用、上调Bcl-2蛋白、下调Bax蛋白、减少Caspase-3蛋白表达而抗细胞凋亡得以实现的。