绞股蓝多糖的分离纯化及其药理活性研究

绞股蓝Gynostemma pentaphyllum（Thunb．）Makino（GP）为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物，又称七叶参、七叶胆、甘茶蔓。全世界有16种和3变种，我国有15种和3变种，主要分布于长江以南各省区，其中以云南种类最多。关于绞股蓝的研究，上世纪九十年代文献报道较多，主要集中在绞股蓝皂苷成分上，较少涉及绞股蓝多糖（Gynostemma pentaphyllum polysaccharides，GPS）的研究，而且涉及绞股蓝多糖的也是绞股蓝粗多糖的研究，未对绞股蓝粗多糖进行分离纯化。根据文献报道，绞股蓝粗多糖的主要药理作用有抗肿瘤和增强免疫力两个作用，另外还有抗氧化等作用。本论文对绞股蓝粗多糖进行了分离纯化，得到了两种精制多糖组分，并对其结构和药理活性进行了初步研究。论文主要内容如下： 1、绞股蓝粗多糖提取方法的优化。绞股蓝药材粉碎后，先用乙醇回流除去单糖、寡糖等小分子物质，然后采用正交实验设计考察了料液比（A）、提取时间（B）、提取温度（C）和提取次数（D）对绞股蓝粗多糖提取率的影响，并结合实际综合考虑提取效率，多糖的性质等，最终确定最佳提取工艺A2B1C3D2，即：10倍量水、100℃、0.5小时提取3次。 2、绞股蓝多糖的分离纯化。绞股蓝粗多糖经氯化钙脱果胶，双氧水脱色得到纯化多糖。纯化多糖经DEAE-Sephrose分离，氯化钠溶液洗脱，紫外210nm结合苯酚硫酸法检测组分，得到GPS-2、GPS-3、GPS-4三个多糖组分。GPS-2、GPS-3、GPS-4各多糖组分再分别经Superdex G-200柱分离，0.15mol／L氯化钠溶液洗脱，紫外210nm检测，收集各组分，冷冻干燥，再经Sephadex G-25脱盐，最后冷冻干燥得绞股蓝精制多糖GPS-2、GPS-3、GPS-4。