芍药花粉超低温保存研究

芍药是我国的传统名花,品种极为丰富,但对其资源的保护保存力度不够,流失严重。本文研究了芍药花粉超低温保存的技术程序以及保存过程中发生的生理生化变化,确定了芍药花粉的超低温保存程序,并对在超低温条件下花粉活力得以长期保存的机理进行了探索。结果表明: 1.超低温技术可以用于芍药花粉的长期保存,在保存近一年后,花粉仍然保持较高的萌发率,有的甚至超过保存前水平。 2.通过实验,确定10%蔗糖+0.1%硼酸为芍药花粉萌发的适宜培养基;直接投入液氮的效果优于3℃和—30℃预冻;自来水冲洗化冻能够较高的保持花粉的萌发率。因此确定了芍药花粉的超低温保存程序为:采集成熟花药—自然散粉—收集花粉—装入冻存管—投入液氮—自来水冲洗解冻—25℃条件,10%蔗糖+0.1%硼酸培养5小时,测定萌发率。 3.温度是影响花粉寿命的主要原因。实验证明,3℃条件可以实现芍药花粉的短期保存(7天以内),—30℃条件下保存一个月的花粉也仍然具有较高的生活力,但要实现芍药花粉的长期保存(一年以上),超低温方法是唯一有效的途径。 4.本实验对芍药花粉超低温保存过程中的生理生化变化进行了研究,从其变化总体趋势来说:随着在液氮中保存时间的延长,细胞膜透性持续上升;MDA含量先下降后上升;超氧自由基代谢速率显著下降;SOD活性有所上升;CAT活性基本保持不变;抗坏血酸含量先上升后下降,到长期保存后又逐渐上升;可溶蛋白和可溶糖则表现为先升后降的趋势;蛋白质的多肽组成在超低温保存前后没有变化。结果表明:在超低温保存1年的过程中,各品种的生理生化指标都发生了一定的变化,但变化程度存在差异,可能在花粉生活力的长期保持中起到的作用不同。