低聚木糖各组分高效液相分析方程的建立及应用

随着对健康关注度的提高,人们对低聚木糖,这种可以显著的增殖肠道有益菌-双歧杆菌的益生元也越来越关注。本文主要研究了玉米芯来源的低聚木糖各不同聚合度糖的标准方程的建立及其应用于低聚木糖对双歧杆菌增殖的代谢分析。 研究表明,采用?KATAfplc层析系统为分离平台,以Bio-Gel P-2为分离介质,XK50/60层析柱,柱温48℃,以高纯水为流动相,洗脱速度1.5ml/min,上样体积为10ml,示差折光检测,可以大量制备纯度不等的木二～木八糖。在采用XK16/100层析柱脱气超纯水洗脱,洗脱速度0.2ml/min,上样体积1ml对各糖纯化,木二～木八糖HPLC纯度分别提高至93.06%、94.40%、94.46%、95.15%、95.23%、94.26%、94.86%. 采用电喷雾质谱和高效液相色谱对木四～木八糖的糖基进行分析,表明其糖基组成只有木糖和阿拉伯糖,不含4-O-甲基葡萄糖醛酸基等其它取代基。 通过浓度与峰高的对应关系,得到木二～木八糖各糖方程: X2 C=0.0002145*H+0.004337;X3 C=0.0001921*H+0.00226; X4 C=0.0002751*H-0.000353;X5 C=0.0002709*H-0.003423; X6 C=0.0002471*H+0.001294;X7 C=0.0002822*H+0.000293; X8 C=0.0002758*H-0.003140 在低聚木糖增殖双歧杆菌的实验中,酶解低聚木糖的转化率是17.85%,当提高低聚木糖中木四、木五、木六、木七糖的浓度,可以将低聚木糖的转化率提高到20.44%,同时也可以提高双歧杆菌对聚合度大于3的糖的利用,同时可以获得更高的菌体浓度,说明聚合度较高的糖对青春双歧杆菌的增殖能力好于聚合度较低的糖。在采用具有通气能力的螺纹试管进行双歧杆菌培养试验发现,在对数生长期后菌体浓度缓慢上升,至培养结束时也未出现衰亡期。高温降解低聚木糖对双歧杆菌的增殖效果不如酶解得到的低聚木糖,但好于阿拉伯糖。 低聚木糖的代谢产物前期以乙酸为主,后期乳酸浓度增加,至发酵结束时与乙酸浓度相当;阿拉伯糖和高温降解低聚木糖的代谢产物以乙酸和丙酸为主。 通过对双歧杆菌代谢低聚木糖的碳平衡分析表明,碳元素最大误差为9.08%,在整个培养过程中碳元素基本平衡,实验数据可靠。