红参抗衰老组分研究

红参是新鲜人参经过清洗、分选、蒸制、烘干等环节加工而成,具有良好的药用价值。以往对红参抗衰老的研究仅限于现象研究如果蝇寿命筛选和抗氧化等单一实验,对抗衰老的机理尚未清晰。基于此,本研究以红参组分为实验原料,利用黑腹果蝇寿命筛选及体内抗氧化实验综合评价红参组分抗衰老效果,利用双向电泳技术、质谱及生物信息学技术等从蛋白质组学方面开展红参抗衰老的机制研究。1、分3个组分进行了果蝇寿命筛选,并筛选出具有显著延长果蝇生命周期的红参组分;同时,结合体内抗氧化实验测定果蝇SOD活力以及MDA含量,综合得知红参组分对果蝇有延长生命周期的作用:红参组分对果蝇平均寿命均有显著的延长效果,相对于对照组,可延长平均寿命9.63%。;相对于对照组,最高组SOD活力升高55.70%,MDA含量降低28.90%。2、通过优化了蛋白破碎及提取方法、蛋白纯化方法以及等电聚焦等方面,建立了一个新型的适于果蝇抗衰老蛋白质差异分析的模型,与液氮研磨及超声破碎相比,Bullet Blenter组织破碎仪法蛋白破碎效果较好;与丙酮沉淀相比,2D Clean up蛋白纯化试剂盒有较好的表现;等电聚焦条件最优选用15000 Volt-hours,此时竖条纹较少且轻。3、质谱鉴定以及生物信息学分析:质谱鉴定结果表明,共鉴定出52个蛋白,鉴定成功率89.70%,对鉴定蛋白进行归类,主要分为细胞生物学进程、分子功能以及细胞组分等三大类;生物信息学分析表明,在已鉴定蛋白中,14-3-3、钙结合蛋白、DNA大亚基、2磷酸果糖醛缩酶、ATP酶、HSP70及HIP1等八种蛋白与果蝇抗衰老密切相关,可能参与了果蝇能量代谢、糖代谢、蛋白代谢以及ROS等途径,并参与果蝇抗衰老的相关信号转导与分子调控。其中BIP蛋白参与由Ras通路并引起一系列衰老进程,14-3-3蛋白能够通过卡路里限制和能量守恒规律激活TOR及PKA通路,进而增加压力感应能力从而提高果蝇寿命。因此,红参组分通过调控这一系列途径使果蝇寿命得以延长。