蒲公英对人胃癌BGC823细胞及小鼠肝癌H22细胞的影响

目的：通过不同浓度蒲公英对荷瘤小鼠肝癌H22细胞和体外培养人胃癌BGC823细胞的增殖、迁移、侵袭作用及相关蛋白表达的影响,探讨蒲公英的抗肿瘤作用及其分子机制。方法：免疫组化法检测不同浓度蒲公英对H22荷瘤小鼠肿瘤组织中TGF-β1、 mTOR、MMP-2和MMP-9等蛋白因子表达的影响。克隆形成、MTS法检测不同浓度蒲公英对BGC823细胞存活率及增殖变化；通过Transwell小室检测不同浓度蒲公英对BGC823细胞迁移和侵袭作用的影响；实时定量PCR检测不同浓度蒲公英对BGC823细胞MMP-2mRNA表达水平的影响。结果：1、在体实验结果显示,不同浓度蒲公英均可抑制H22荷瘤小鼠瘤组织的增殖,与对照组相比,有显著性差异(P<0.05)。免疫组化结果表明,蒲公英可下调瘤组织中TGF-β1、mTOR、MMP-2和MMP-9的表达。2、三个浓度蒲公英都可抑制胃癌BGC823细胞的增殖,并且随着浓度的增加,细胞克隆数呈显著下降趋势(t=2.011、1.812、1.214,P<0.05)；2.5mg/ml蒲公英可抑制BGC823细胞增殖能力,随着用药后培养时间延长细胞增长水平逐渐下降；4.0 mg/ml蒲公英抑制BGC823细胞增殖的作用最强(P<0.05)。3、Transwell小室检测结果显示,三个浓度蒲公英都可使BGC823细胞迁移数减少,且随着浓度的增加这种作用逐渐增强,2.5 mg/ml和4.0mg/ml组与对照组相比,有显著性差异(t=0.359、0.297,P<0.05),这两组之间没有显著差异(P>0.05),表明在一定浓度范围内,蒲公英浓度的变化对癌细胞的迁移变化影响不大。蒲公英对BGC823细胞侵袭作用的影响与迁移基本一致。4、RT-PCR结果显示,不同浓度蒲公英均可下调BGC823细胞MMP2mRNA表达,随蒲公英浓度的增加下调作用逐渐增强；在2.5 mg/ml和4.0mg/ml浓度时,MMP-2表达的下调作用有显著差异(P<0.05)。结论：1、蒲公英对H22荷瘤小鼠肝癌细胞生长具有抑制作用,中剂量组(0.25g/m1)药物浓度对荷瘤小鼠癌组织生长有明显的抑制作用。2、蒲公英下调TGF-β1和mTOR因子的表达,从而抑制信号传导通路中下游相关因子的表达调控,抑制癌细胞的增殖。对于调控细胞转移的主要分子MMP-2和MMP-9也有一定的下调作用,说明蒲公英通过抑制相关因子的表达变化来抑制肿瘤细胞的增殖和转移。3、蒲公英对体外培养的BGC823细胞也有较明显的抑制作用。这种作用可能通过下调BGC823细胞MMP-2的表达,发挥抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的作用。