AngⅡ对人脐静脉内皮细胞BMP-2表达的影响

研究背景： 骨形态发生蛋白-2(BMP-2)作为转化生长因子-β细胞因子超家族中的一员，在血管发育及血管病理生理过程中有着极其重要的作用，敲除BMP-2基因的小鼠在妊娠期骨形成发育之前就会出现因心脏的缺陷而死亡，这足以证明了BMP-2在心血管系统的发生和发展中所起的重要作用。特别是BMP-2与血管钙化关系较为密切，研究表明大约有80％的动脉粥样硬化病变中存在动脉钙化。许多证据也显示：许多控制骨矿化过程的蛋白参与了骨钙化的调节。体外动脉血管壁细胞的培养，在某些炎性刺激和致动脉硬化因素刺激下可以诱导形成成骨样细胞。许多与调节骨形成及骨结构有关的蛋白在动脉粥样斑块处发现有表达，而BMP-2是骨钙化也是血管钙化中强有力的基本因素，所以研究BMP-2对于研究血管钙化和动脉粥样硬化中的斑块钙化有重要的意义。有研究发现高血压患者人群中钙化的发生率比较高，而肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAS)及其主要活性物质血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在动脉粥样硬化发生发展中居于核心地位，起着关键性作用，它通过影响血管内皮细胞、单核／巨噬细胞和平滑肌细胞、促进血管新生、影响脂质代谢等多方面参与动脉粥样硬化的病理生理过程，但其与BMP-2及与动脉钙化的关系如何，相关研究鲜有报道。本课题通过基础研究实验观察AngⅡ刺激对人脐静脉内皮细胞分泌BMP-2的影响，来研究AngⅡ与血管钙化之间的可能关系，为临床冠心病和血管钙化的防治提供线索和思路。 目的： 研究AngⅡ对人脐静脉内皮细胞表达BMP-2的影响，初步探讨AngⅡ对BMP-2表达影响的可能机制。 方法： 培养人脐静脉内皮细胞，测定不同刺激条件下细胞培养上清液中BMP-2的浓度。同时用免疫组化法检测各实验组细胞内NFkb-P65的表达。 结果： 1)不同浓度AngⅡ刺激使人脐静脉内皮细胞培养上清液中的BMP-2水平呈剂量依赖性增加，BMP-2从无AngⅡ刺激组的14.76±1.44 2pg／ml升高到20umol／L AngⅡ刺激组的78.51±2.16pg／ml(p＜0.05)，厄贝沙坦干预使20umol／LAngⅡ刺激组的BMP-2表达水平从78.51±2.16 pg／ml下降至22.62±2.47 pg／ml(p＜0.05)。 2细胞免疫组化结果显示，AngⅡ在增加BMP-2表达的同时，NFkb-P65表达也相应增强，厄贝沙坦干预使AngⅡ诱导的NFkb-P65的表达水平下降。 结论： 1)AngⅡ可以剂量依赖性刺激人脐静脉内皮细胞BMP-2的表达，而厄贝沙坦可抑制AngⅡ诱导的脐静脉内皮细胞BMP-2的表达。 2)AgⅡ诱导BMP—2表达的机制可能是通过抑制NF-kB途径来实现的。