维药毛菊苣保肝作用及有效成分含量测定

目的：1.探讨毛菊苣不同部位对四氯化碳（CCl4）致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用；2.毛菊苣中化学成分研究及对照品制备；3.菊苣药材不同部位五种主要有效成分含量测定。方法：1.昆明种小鼠雌雄各半，随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、毛菊苣全草和毛菊苣种子不同部位提取物低、中、高剂量组。实验组小鼠连续口服给药28天，正常对照组和模型组给予等量的水。第29天除正常对照组之外其他组小鼠以0.2%的CCl4橄榄油溶液10mL/kg灌胃造模，测定各组小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）的含量，并观察肝脏病理组织学变化；2.取干燥的毛菊苣根，甲醇回流提取，合并提取液，浓缩，得到浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。对乙酸乙酯部位进行硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱（2:1～1:2，V/V）。对得到的化合物采用1HNMR和13CNMR法进行结构鉴定；3.采用UPLC法对毛菊苣和菊苣的根、全草、种子中的秦皮甲素、秦皮乙素、山莴苣素、山莴苣苦素和菊苣酸进行含量测定。结果：1.与模型组比较，毛菊苣各提取物均能显著降低小鼠血清ALT（P＜0.05）和极显著降低小鼠血清AST（P＜0.01）水平；各剂量组均能不同程度地改善肝脏病理组织损伤，对肝脏指数的影响未有显著性差异（P＞0.05），其中以乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物显示较强的肝保护作用；2.分离得到化合物Ⅰ（15mg）、化合物Ⅱ（120mg）和Ⅲ（20mg），确定结构分别为山莴苣素、山莴苣苦素和β-谷甾醇；3.菊苣和毛菊苣根、全草、种子中秦皮甲素、秦皮乙素、山莴苣素、山莴苣苦素和菊苣酸的含量存在一定程度的差异：毛菊苣中秦皮甲素和秦皮乙素的的含量都高于菊苣中的含量；秦皮甲素在全草中含量最高，秦皮乙素在种子中含量最高。毛菊苣根和种子中的山莴苣素、山莴苣苦素的含量高于菊苣中的含量，尤其是根中含量很高。菊苣根和种子中的菊苣酸的含量高于毛菊苣，全草中菊苣酸的含量略低于毛菊苣。结论：毛菊苣中香豆素类化合物和倍半萜内酯类化合物应是保肝作用的有效成分，本研究为进一步研究化合物肝保护作用、筛选保肝新药奠定基础。