藏药波棱瓜子乙酸乙酯部位化学成分研究

波棱瓜子是葫芦科波棱瓜属植物波棱瓜Herpetospermum caudigerum Wall的干燥成熟种子,在藏医药中应用较为广泛；波棱瓜生长在海拔2300～3500m的山坡灌丛、林缘及路旁,主要分布在四川、云南、西藏及印度等地。其药性寒,味苦,能清胆热、肝火,对“赤巴”引起的黄疸、肝炎、消化不良及肝胆疾病有较好的疗效。目前国内外报道的波棱瓜子化学成分主要有脂肪酸类、木脂素类、氨基酸和多糖类成分。对波棱瓜子的药理作用研究表明,波棱瓜子乙酸乙酯部位对乙肝病毒有明显的抑制作用,从中分离得到的部分单体对肝损伤以及肝炎有较好的治疗作用。本文对波棱瓜子乙酸乙酯部位化学成分进行了提取分离鉴定,并对部分化合物进行了活性研究,为进一步药效实验提供前期参考。本研究先将波棱瓜子干燥种子粉碎,再用95%乙醇在加热回流提条件下提取其化学成分,合并后浓缩,然后用热水分散所得浓缩液,之后顺次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取后浓缩后获得各相应部位。除糖除脂后得到乙酸乙酯部位浸膏237g,重复交叉使用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、凝胶Sephadex LH-20、重结晶、半制备HPLC等手段进行处理,最终得到单体化合物。然后,联合LC-MS、1H-NMR、13 C-NMR、二维核磁共振等方法对分离得到的单体化合物进行结构鉴定,共确定32个单体化合物的结构,其中包括27个木脂素类化合物,3个三萜类化合物,1个香豆素类化合物,1个黄酮苷类化合物,分别为：波棱芴酮(1)、波棱素(2)、Herpetrio ne(3)、Herpetone(4)、Herpetetrone (5)、(+)-(7'S,7"S,8'R,8"R)-4,4',4"-trih ydroxy-3,5',3"-trimethoxy-7-oxo-8-ene [8-3',7'-O-9",8'-8",9'-O-7"] lignoid (6)、He dyotol A (7)、去氢双松伯醇(8)、Herpetol (9)、Herpetotriol (10)、Picrasmali gnan A (11)、Herpetal (12)、Balanophonin (13)、1-Propanone,3-hydroxy-1-(4-h ydroxy-3-methoxyphenyl)-2-[4-(3-hydroxy-1-propen-1-yl)-2-methoxyphenoxy]-(14) erythro-Guaiacylglycerol-β-coniferyl ether (15)、threo-Guaiacylglycerol-β-coniferyl et her (16)、(7R,8S)-Dehydrodiconiferyl alcohol γ'-methyl ether (17),3-Benzofuran methanol,2,3-dihydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-7-methoxy-5-(3-methoxy-1-propen yl)-, [2S-[2a,3b,5(E)]]-(9CI) (18)、Evofolin-B (19)、1-Propanone,3-hydroxy-1-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-(20)、葫芦素R(21)、葫芦素D (22)、Cucurbitacin B(23)、波棱内酯A (24)、Kaempferol 3,7-L-dirhamnoside (25)、Herpetatol A(26)、Herpetatol B (27)、Herpetatol C (28)、H erpetatol D (29)、Herpetatol E(30)、Herpetatol F (31)、Herpetatol G (32).其中化合物26～32为新化合物,依次命名Herpetatol A-G,其余化合物中7、11、13、15～22、25为首次从该波棱瓜子中分离得到。对分离得到的部分化合物进行活性研究,研究表明化合物2、3对白色念珠菌具有一定抑制作用,其MIC分别为10.5μM和9.2μM。而在细胞毒活性研究中,化合物22在10μM时具有较强的细胞毒活性,但进一步研究却表明该化合物对所用肿瘤细胞抑制率却低于抗肿瘤阳性药阿霉素。