菊苣中菊苣酸的提取工艺及指纹图谱的研究

菊苣酸已被欧美国家作为免疫增强剂而广泛使用。从天然植物中提取菊苣酸的方法多集中于从紫锥菊中提取,本文选择菊苣作为原料,是因为菊苣有被作为蔬菜食用的习惯,其安全性已被认可,同时它被列入国家卫生部颁布的药食同源原料名单之中,因而从菊苣中提取菊苣酸更具有意义。 通过对多种菊苣原料(包括菊苣和毛菊苣)中菊苣酸含量进行分析,发现不同菊苣种属、不同产地、不同部位植物原料中菊苣酸含量都有差异,聚类分析结果表明菊苣和毛菊苣存在明显差异。菊苣地上部分菊苣酸的含量最高,且这部分通常是被废弃的,因而是提取菊苣酸的最佳原料。 本文分别研究了溶剂提取法和超声辅助溶剂提取法两种方法提取菊苣酸的最佳工艺。通过均匀试验设计得到溶剂提取法最优工艺条件为24倍54%乙醇90℃加热回流1h;正交试验设计得到超声辅助溶剂提取法的最优工艺为12倍54%乙醇,40W功率,超声30min。超声辅助溶剂提取工艺与传统工艺相比,具有溶剂使用量小,时间短,无需高温加热的优势。对超声辅助溶剂提取法的探索为缩短样品检测前处理时间提供了理论依据。 试验得到精制的最优工艺为:提取浸膏不稀释,用1倍乙酸乙酯在60℃萃取1次,萃取率在84%以上。研究中还发现不同的干燥方式对菊苣酸含量有一定影响,其中喷雾干燥与冷冻干燥相差不大,但都明显高于真空干燥。利用反相液相制备色谱制备了菊苣酸对照品,纯度达95%以上。 本文还建立了菊苣提取物的HPLC指纹图谱,最终确定指纹图谱共有峰为8组,并且这8组共有峰在原料菊苣地上部分中也都得到了验证。计算了10批菊苣提取物与对照指纹图谱的相似度,夹角余弦均大于0.998,相关系数也均大于0.997。良好的相似性也说明整个菊苣提取物的提取精制工艺稳定。10批提取物平均菊苣酸含量为7.22%,可作为保健食品的生产原料。