安石榴苷对LPS诱导的炎症及相关信号转导通路的影响

安石榴苷是石榴皮多酚中的主要活性成分,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生理活性,在医疗和功能食品等领域都有很大的开发空间。炎症是动物机体针对各类损伤因子,所做出的一系列复杂的生理性防御反应。炎症在多种疾病中发挥重要作用,并且过度炎症反应导致的死亡率居高不下,因此,寻找治疗炎症的天然方式,并深入研究炎症发生的机制,对于控制过度炎症反应是非常迫切和必要的。因此,本文对安石榴苷的抗炎作用及相关作用机制进行了深入研究,为食品副产品石榴皮能够更好的被综合应用提供实验依据。本课题旨在通过体内和体外实验,研究安石榴苷的抗炎活性以及相关炎症信号转导通路,论文分为三个部分:1、考察安石榴苷的体外抗炎活性;2、考察安石榴苷对急性肺损伤小鼠的保护作用;3、探究安石榴苷对MAPKs和NF-κB信号转导通路的影响。首先,初步考察安石榴苷的体外抗炎活性。建立脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核-巨噬细胞RAW 264.7的体外炎症模型,考察不同浓度安石榴苷(1,2,4μg/m L)对RAW 264.7细胞的相关炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-10的影响。结果显示,安石榴苷抑制了TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌,促进了IL-10的分泌,这与其m RNA的表达结果一致,并呈现剂量依赖性。结果表明,安石榴苷通过调节细胞因子的分泌及相关基因的表达而发挥抗炎作用。其次,考察安石榴苷对急性肺损伤小鼠的保护作用。建立LPS诱导的急性肺损伤模型,考察预注射安石榴苷(4 mg/kg)对多个指标的影响,指标包括小鼠肺组织湿干重(W/D)比率、髓过氧化物酶(MPO)活性、组织病理学评价、支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度以及炎性细胞因子含量。结果显示,安石榴苷能显著地降低小鼠肺组织的W/D比率和MPO的活性,减少BALF中蛋白浓度和炎性细胞数量,抑制BALF中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量,同时,病理切片结果也证实,安石榴苷对LPS诱导的急性肺损伤具有保护作用。最后,探究安石榴苷对MAPKs和NF-κB信号转导通路的影响。建立LPS诱导的急性肺损伤模型,考察安石榴苷(4 mg/kg)对MAPKs信号通路的影响,结果显示,安石榴苷显著抑制了LPS诱导的急性肺损伤模型中p38 MAPKs蛋白表达。同时,安石榴苷(1,2,4μg/m L)显著抑制了LPS刺激的小鼠RAW 264.7巨噬细胞中NF-κB的活力,作用呈剂量依赖性。结果说明,安石榴苷可能通过调控p38 MAPKs/NF-κB信号通路发挥对急性肺损伤小鼠的保护作用。综上所述,安石榴苷具有很好的抗炎活性,并且对急性肺损伤小鼠具有保护作用,其作用可能是通过抑制p38 MAPKs和NF-κB信号转导通路实现的。