兖州卷柏成分及抗肿瘤活性成分研究

作为一种常用的民间草药,本文对卷柏科卷柏属植物兖州卷柏[Selaginella involvens（Sw.）Spring]中分离所得的双黄酮类、色酮类成分进行了化学成分及部分生物活性的研究。利用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20柱层析等色谱技术分离方法,从兖州卷柏70%乙醇提取物中,分离得到了8个化合物,并借助各种化学方法和色谱光谱手段(TLC、UV、IR、1H NMR、13C NMR、1H-1H COSY、HMBC、HSQC、LC-MS/MS)对其结构进行了分析鉴定,它们分别为:8-[6-羟基-2-对羟苯基-苯并吡喃酮]-乙酸（1）,4'-甲氧基罗伯斯特双黄酮（2）,罗伯斯特双黄酮（3）,穗花杉双黄酮（4）,正二十四烷酸（5）,十九烷酸（6）,β-谷甾醇（7）,豆甾醇（8）,以上化合物均系首次从中兖州卷柏分离得到,其中化合物1为新化合物,命名为兖州卷柏黄酮乙酸。 鉴于双黄酮和色酮类成分具有较广泛的生理活性,尤其是在抗肿瘤方面有着突出作用,故对部分分离所得的化合物经行了体外抗肿瘤筛选。本文将分离兖州卷柏得到的新化合物和三种双黄酮成分与抗肝癌药物甲氨蝶呤（MTX）和人肝癌细胞HepG2共培养,采用MTT法研究分离的化合物对体外人肝癌细胞HepG2的抑制活性。结果表明各化合物均有一定的活性,其中化合物3具有比MTX更强的抑制肝肿瘤细胞HepG2生长的活性,显示出其成为一种新的抗肝癌药物的良好潜质。 采用UV法测定总黄酮的含量,对比传统的浸提、索氏提取、微波辅助提取和超声提取法对兖州卷柏的总黄酮的提取。优选微波提取法,优选微波辅助提取法,在单因素实验的基础上,通过正交试验,确定提取兖州卷柏总黄酮的最优提取条件。结果表明以70%乙醇为溶剂,料液比为1:20,功率为462W时,用微波辅助法提取10min为兖州卷柏总黄酮的最优提取条件。这一结果为中草药的提取与分离进行大规模的工业生产提供参考依据。