狼疮性肾炎COX-2的表达及选择性COX-2抑制剂对其作用的研究

研究背景：狼疮性肾炎（lupus nephritis,LN）是系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)最常见的临床表现，肾脏损害的程度是影响SLE预后的重要因素。随着糖皮质激素、环磷酰胺、霉酚酸酯等免疫抑制剂在LN中的运用，LN治疗取得了长足的进步，但仍有部分患者治疗无效。而且感染、肝肾毒性、骨髓抑制等严重副作用在很大程度上限制了其广泛应用，促使人们寻求更为有效的办法以解决免疫抑制剂所带来的诸多问题。 环氧化酶（cyclooxygenase，COX）是前列腺素（prostaglandin，PG）合成过程中的限速酶，近年来发现COX有两种同功酶COX-1、COX-2， COX-2是与炎症相关的酶，其可被内皮细胞、巨噬细胞和成纤维细胞所分泌的炎症介质所诱导产生。两者均可将花生四烯酸代谢成各种前列腺素产物。前列腺素的合成在肾脏中非常活跃，PG在肾血流、肾小球滤过率、肾素释放以及水电解质方面起着重要的平衡、调节作用。在狼疮性肾炎小鼠肾内COX-2表达增高、其代谢产物TXA2的产生增加， 前列腺素E2参与了鼠狼疮性肾炎的发病过程 。使用特异性COX-2抑制剂是否能抑制LN的炎症反应，减少蛋白尿、保护肾功能、延缓肾小球硬化的进展，目前研究尚少。 目的： 探讨MRL/ lpr狼疮小鼠肾组织COX-2的表达及特异性COX-2抑制剂对MRL/ lpr狼疮小鼠治疗作用及其有关机制。 方法： MRL/ lpr狼疮小鼠随机分为两组：对照组和Rofecoxib组，观察两组小鼠24小时尿蛋白排泄量、血清肌酐、血清AngII、血清抗ds-DNA抗体结合率、尿6-Ket-F1α、尿TXB2、血清和尿中IL-6、TNF-a的变化以及肾组织病理改变及其COX-1、COX-2、TGF-β1、PAI-1及CD14+（单核细胞）在肾组织的表达。 结果： ①Rofecoxib组与对照组比较，小鼠肾组织COX-1的表达差异无显著性。②Rofecoxib组小鼠肾组织COX-2的表达受抑，血清AngII及尿TXB2降低，与对照组比较差异有显著性。③Rofecoxib组小鼠血清和尿中IL-6、TNF-a水平明显降低，与对照组比较差异有显著性。④Rofecoxib组尿6-Ket-F1α及抗ds-DNA抗体结合率水平无明显变化，与对照组比较无显著性差异。⑤Rofecoxib组小鼠肾组织TGF-β1、PAI-1、CD14+的表达受抑，与对照组比较差异有显著性。⑥对照组小鼠肾小球基底膜（glomerular basement membrane， GBM）增厚，系膜基质增多；免疫荧光显示GBM上IgG沉积明显增加，与Rofecoxib组比较，差异有显著性。⑦对照组小鼠肾组织活动性指数评分增加，与Rofecoxib组比较，差异有显著性。⑧肾组织慢性指数评分两组间 比较差异无显著性。⑨Rofecoxib组小鼠24小时尿蛋白排泄量、血清肌酐水平与对照组比较差异有显著性。 结论： 选择性COX-2抑制剂（Rofecoxib）对MRL/ lpr自发狼疮小鼠狼疮性肾炎具有良好的治疗作用。能通过减少鼠肾组织单核细胞的浸润，减轻肾脏的炎症反应，从而减少肾组织COX-2的表达；选择性COX-2抑制剂能降低血管紧张素II及COX-2的代谢产物TXA2水平；选择性COX-2抑制剂具有免疫调节作用，可明显抑制细胞因子的产生，减少小鼠血清和尿中IL-6、TNF-α的水平；选择性COX-2抑制剂可抑制小鼠肾组织TGF-β1、PAI-1的表达，阻止细胞外基质的聚集；选择性COX-2抑制剂能防止免疫球蛋白IgG沉积于肾小球基底膜而引起的病理损害，降低狼疮小鼠尿蛋白排泄量，稳定肾功能，改善肾组织的病理损伤。