本文对山葡萄籽中原花青素提取、降解进行了研究,优化了工艺路线。以四十份山葡萄种质资源为试材,对山葡萄各个重要发育时期的叶片,茎皮,果实中的原花青素动态含量变化进行了测定,分析了原花青素在山葡萄各组织器官中的变化规律和山葡萄种质资源间原花青素含量和分布的特点与差异性,主要结果如下:
1、确立了山葡萄黄烷-3-醇的HPLC洗脱程序:流动相配比:A:1%乙酸;B:80%乙腈,1%乙酸,0min→5min→15min→25min→30min→35min,动相A对应的梯度为95%→70%→50%→40%→95%→95%。
2、原花青素的最佳提取工艺为:以乙醇为提取剂,温度60℃,浓度70% ,时间为120min,料液比为1:5,提取率为3.12%.。
3、溶剂分离法分离制备原花青素高聚体,综合聚合度与过氧化值指标,确定优化降解工艺为:乙酸为降解介质,料液比6:5,降解时间20min,降解温度70℃,聚合度从6.9下降到4.8,聚合度下降2.1。
4、山葡萄种质资源叶片中原花青素动态含量变化趋势为:萌芽期→花后一周,缓慢上升;花后一周→浆果膨大期,含量急剧上升,并达到最大值;浆果膨大期→转色期,含量迅速下降;转色期→成熟期,含量上升。
5、茎皮原花青素动态含量变化趋势为:萌芽期→花后一周,缓慢上升;花后一周→浆果膨大期,含量急剧上升,并达到最大值;浆果膨大期→浆果转色期→浆果成熟期,含量迅速下降。
6、种子中原花青素动态含量变化趋势为:花后一周→浆果膨大期→浆果转色期,含量迅速上升并在转色期达到最大值;浆果转色期→浆果成熟期,含量迅速下降。成熟期含量最高的种质资源为:4N1 ,4N2 ,燕山。
7、果皮中原花青素动态含量变化趋势为:花后一周→浆果膨大期,含量很低,缓慢上升;浆果膨大期→浆果转色期,含量迅速升高;浆果转色期→浆果成熟期,含量急剧上升,并达到顶峰。浆果成熟期含量最高的种质资源为: 086034,8558814,8558831。果肉中含量在整个果实发育期间含量非常低微。
8、山葡萄成熟果实果皮中原花青素含量高于种子,且差异性极为显著,与欧亚种酿酒葡萄相比具有明显的种间差异性。