蝉花真菌的筛选及其液态发酵工艺的优化

蝉花是一种历史悠久的药用真菌,其含有多种氨基酸、无机盐和生物活性类物质。随着自然环境的变化,蝉花资源开始稀缺,本文从蝉花中微生物的筛选、优良蝉花菌株的选育和蝉花液态发酵工艺的优化三个方面对人工培育蝉花进行研究,所得结果如下： 1.从天然蝉花中对其微生物进行分离筛选,得到蝉花真菌V17,经鉴定该菌株为蝉拟青霉。将菌株进行液态发酵,5d时获得的生物量为5.25g/L。对蝉花菌丝体的粗成分进行测定,其水分含量为8.91%,粗蛋白含量为27.19%,粗脂肪含量为7.79%,粗纤维含量为6.20%,灰分含量为1.71%,与天然蝉花的成分接近。测定其菌丝体中生物活性物质,其虫草酸的含量为149.52mg/g,真菌多糖的含量为122.02mg/g,均高于天然蝉花的含量。 2.采用紫外线对蝉花真菌V17进行诱变,诱变的剂量为90s,致死率为85%,得到一株菌丝体产量较高的菌株V17-7,其发酵液中的生物量为5.99g/L,增加了14.10%。对V17-7菌株的菌丝体中生物活性物质进行测定,其菌丝体中虫草酸含量达197.24mg/g,增加31.92%；真菌多糖含量达137.24mg/g,增加12.48%。对该菌株进行传代试验,连续传代7次,各项数值基本不变,遗传性稳定。 3.对蝉花真菌的发酵培养基中的C源、N源、蝉蜕添加量等条件进行研究,得出在PDA液态培养基中添加2.5%的葡萄糖、0.3%的蛋白胨和3%的蝉蜕可以提高发酵液中的生物量；通过改变发酵过程中的培养温度、接种量大小和摇床速率的大小,对液态发酵工艺进行优化,最优的发酵工艺为28℃、6%的接种量和210r/min的摇床速率。通过对培养基和发酵工艺的优化,发酵液中的生物量提高到6.97g/L。