研究目的
本论文采用高脂饮食建立实验性高脂血症动物模型,通过检测小鼠外周血内毒素、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及白介素-6(IL-6)水平,研究中医经典方剂黄连解毒汤抗高脂血症状态下炎症的机制,并利用PCR-DGEE指纹图谱和实时荧光定量PCR技术研究黄连解毒汤对高脂血症小鼠肠道菌群变化的影响。
研究方法
将48只C57BL/6雄性小鼠随机分为6组：常规饮食组；常规饮食加抗生素组；高脂饮食组；高脂饮食加抗生素组；高脂饮食加黄连解毒汤高剂量组；高脂饮食加黄连解毒汤低剂量组。常规饮食组和高脂饮食组分别进食普通饲料和高脂饲料8周；黄连解毒汤组进食高脂饲料6周后分别给予高、低浓度黄连解毒汤,每只动物每天灌胃0.4mL,连续灌胃2周；抗生素组分别进食普通饲料和高脂饲料6周后用抗生素,自由饮用2周。8周后,进行血清TNF-α、IL-6和内毒素含量的检测,利用PCR-DGEE指纹图谱和实时荧光定量PCR技术进行肠道内菌群结构和种类的分析。
研究结果
1.高脂饮食组小鼠血液中总胆固醇(TC)水平显著升高,黄连解毒汤组小鼠总胆固醇水平在黄连解毒汤干预2周后无显著改变；
2.高脂血症小鼠血清中肿瘤坏死因子、白介素-6和内毒素含量明显升高,黄连解毒汤低剂量组小鼠在黄连解毒汤干预2周后,血清中的肿瘤坏死因子、白介素-6和内毒素含量均有明显下调,黄连解毒汤高剂量组各指标没有出现明显变化；
3.高脂饮食组肠道内细菌种类较多,多样性程度也比较高,正常饮食组及黄连解毒汤高、低剂量组次之,两个抗生素组小鼠肠道内细菌种类和多样性程度最低。黄连解毒汤高、低剂量组肠道的细菌种类和多样性比较相近,形成了相对稳定的细菌群落结构；
4.两抗生素组小鼠肠道内的三种益生菌几乎没有表达,与高脂饮食组相比,常规饮食组和黄连解毒汤高剂量组拟杆菌表达量显著升高,常规饮食组和黄连解毒汤低剂量组双歧杆菌表达量显著升高,黄连解毒汤高剂量组和黄连解毒汤低剂量组乳酸杆菌表达量明显增加。与常规饮食组相比,黄连解毒汤高剂量组和黄连解毒汤低剂量组乳酸杆菌表达量显著升高。
研究结论
黄连解毒汤低剂量具有改善高脂血症状态下的代谢性炎症的作用,并且对高脂血症状态下的内毒素水平具有明显下调的作用。高胆固醇饮食可以改变肠道菌落结构,变化的细菌可能与脂质代谢密切相关,从而影响高脂血症的发生发展。黄连解毒汤可以抑制影响脂质代谢的细菌的生长,调节肠道形成新的、更有益于脂质代谢的、稳定的菌落结构。高脂血症小鼠肠道中的益生菌受到了抑制,而黄连解毒汤低剂量对肠道益生菌具有良性调节作用。
