西青果中抑制α-葡萄糖苷酶活性成分研究

α-葡萄糖苷酶抑制剂可以有效控制餐后血糖升高，在Ⅱ型糖尿病治疗中，被视为首选药物，目前临床上应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂药物存在开发难、种类少、副作用大等问题，因此从天然产物中寻求安全、有效的α-葡萄糖苷酶抑制剂成为热点研究。近年来，西青果粗提物已被多次证明具有高抑制α-葡萄糖苷酶活性，并且已有部分活性化合物从西青果中被分离纯化，本次研究采用活性跟踪的方式，对西青果进行系统分离，希望进一步认识西青果中抑制α-葡萄糖苷酶活性成分。 以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物，高效液相色谱进行检测，建立α-葡萄糖苷酶抑制剂体外活性筛选模型。以活性跟踪方式对西青果中抑制α-葡萄糖苷酶成分进行研究，主要通过萃取、硅胶制备柱、LH-20制备柱和C18制备柱等分离手段，达到化合物分离纯化目的。在分离过程中以硅胶薄层色谱、HPLC分析结果指导柱分离。 本次研究发现西青果中存在多种抑制α-葡萄糖苷酶活性成分，萃取所得组分经活性测试，抑制率结果为：乙酸乙酯相＞水相＞正丁醇相，石油醚相没有活性。对西青果乙酸乙酯相进一步抑制活性跟踪分离，第一次柱分离共得八个组分，经活性测试，在质量浓度为1.0mg/mL下，抑制率大于80%的组分有三个：Yb、Yc、Yh。Yb组分第一次柱分离后，得到化合物1和四个组分（Fr.b1、Fr.b2、Frb.3、Fr.b4），在质量浓度为0.1mg/mL下，四组分活性测试结果为：Fr.b1＞Fr.b3＞Fr.b2＞Fr.b4；Fr.b1和Fr.b3因量少，放弃进一步分离； Fr.b2经硅胶柱、LH-20柱分离纯化后，得到化合物2。Yc组分经第一次柱分离后，得到化合物4和11个组分，在质量浓度为1.0mg/mL下，Fr.c7抑制率最高，Fr.c7经硅胶柱、LH-20柱、C18柱分离纯化后，得到化合物3和5。利用核磁（1H谱和13C谱）对5个化合物进行结构鉴定，分别为5-羟甲基糠醛（1）、arjunic acid（2）、arjunolic acid（3）、阿江榄仁素（4）和没食子酸甲酯（5），其中5-羟甲基糠醛、arjunicacid、arjunolic acid和没食子酸甲酯为活性单体，它们的半抑制浓度IC50值分别为21.20μmol/mL、2.97μmol/mL、0.82μmol/mL、13.76μmol/mL，化合物2和3的活性明显高于阿卡波糖（IC50=3.87μmol/mL），5-羟甲基糠醛首次从西青果中分离得到。