姜黄素对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎作用的实验研究

目的:探讨姜黄素对DSS诱导的小鼠急性期UC的肿瘤坏死因子（TNF）-α、髓过氧化物酶（MPO）影响及其对UC治疗作用，同时检测结肠黏膜磷酸化p38MAPK及p38MAPK mRNA的表达，探讨p38MAPK信号通路在溃疡性结肠炎疾病中的机制，以及姜黄素对小鼠UC模型中p38MAPK通路的影响。方法：将健康60只雌性BALB/c小鼠，鼠龄6-7wk，体重16-20g，按随机数字表分为6组：正常组（A组）、模型组（B组）、地塞米松干预组（C组：1.5mg/kg.d）、姜黄素低剂量干预组（D组:姜黄素15mg/kg.d）、姜黄素中剂量干预组（E组：姜黄素30mg/kg.d）、姜黄素高剂量干预组（F组：姜黄素60mg/kg.d），每组10只。正常组自由饮水，其余各实验组小鼠均给予5％DSS溶液连续7d自由饮用，并在造模第一天同时开始腹腔注射给药，姜黄素低、中、高剂量干预组分别按上述剂量给药，正常组注射等体积生理盐水，模型组注射等体积的2.5%乙醇溶液。在实验期间每天定时观察各组小鼠进食、饮水、毛色、活动及大便性状，称量体重，观察大便隐血情况，并进行疾病活动指数评分（DAI），至造模第8天全部小鼠均处死，收集小鼠结肠组织，一部分用于石蜡包埋切片，HE染色，并观察组织病理学损伤情况,行组织学评分；另取两份组织保存于液氮中备用。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测结肠黏膜组织肿瘤坏死因子（TNF）-α、髓过氧化物酶(MPO)的表达；应用免疫组织化学染色观察结肠组织p-p38MAPK的表达情况及逆转录转氨酶链聚合反应（RT-PCR）方法检测结肠组织内p38MAPKmRNA的表达。结果：1.B组小鼠症状、组织学检查均符合UC诊断标准，且DAI及组织学评明显高于A组，经过地塞米松和姜黄素干预后，C组、D组、E组和F组DAI及组织学评分有不同程度的降低。2.ELISA结果： B组结肠黏膜中TNF-α、 MPO的含量分别为（382.26±21.82、339.31±13.61）明显高于C组（257.42±19.04、238.95±11.17）、D组（333.67±17.72、298.93±9.94）、E组（287.89±19.57、258.60±13.07）和F组（271.10±13.25、248.52±9.24），有统计学差异（P均＜0.01），C组的含量显著低于D组、E组的含量，有统计学差异（P＜0.05），C组同F组相比差异无统计学意义（P＞0.05）；E组、F组较D组含量低，差异有统计学意义（P＜0.05），F组较E组降低，但差异无统计学意义（P＞0.05）。3.免疫组织化学法结果：B组小鼠结肠黏膜p-p38MAPK表达（6.80±0.77）明显高于A组（0.52±0.32），差异有统计学意义(P＜0.01)，经地塞米松及姜黄素低、中、高剂量干预后,C组(2.50±0.82)、D组（4.36±1.02）、E组（3.62±0.79）、F组（3.12±0.63）均较B组有显著降低，有统计学差异（P＜0.01），C组表达明显低于D组、E组，差异有统计学意义（P＜0.05），D组较E组、F组升高（P值均＜0.05），E组与F组差异无统计学意义（P＞0.05）。4.RT-PCR结果：B组结肠组织内p38MAPK mRNA明显高于A组，C组、D组、E组和F组均较B组有不同程度的降低，其中以F组表达最低。结论：姜黄素对DSS诱导的小鼠急性期UC有一定治疗作用，可能是通过抑p38MAPK信号通路，减少TNF-α等促炎因子的释放，减轻中性粒细胞的浸润，从而减轻UC小鼠肠粘膜炎症损伤而发挥治疗UC作用。