山茱萸中熊果酸提取及其生物学活性研究

山茱萸是我国传统的名贵中药,具有多种生物学活性成分,包括环烯醚萜类、皂苷、多糖、熊果酸、齐墩果酸、鞣质等。熊果酸是山茱萸中主要的活性成分之一,其分子结构属于五环三萜类,具有抗癌、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎、保肝和降血脂等生物学活性。目前熊果酸较难化学合成,一般以从植物体内提取为主。本文就山茱萸中熊果酸的提取分离及生物学活性做了以下三个方面的研究: 1山茱萸中熊果酸提取及工艺优化研究试验 以山茱萸为原料,采用超声波辅助发酵法提取熊果酸,以HPLC测定熊果酸的含量,研究熊果酸提取的最佳工艺条件。结果表明:选择色谱柱Hypersil C18（5μm,25 cm×4.6 mm）、流动相甲醇-水-磷酸（90∶10∶0.1）、检测波长为215 nm、流速为1.2 mL·min-1、柱温室温的条件,熊果酸进样量在2.40～12.00μg范围内线性关系良好,重现性好,添加回收率为94.2%。30℃下,酵母接种量和原料质量比为3∶80,摇床转速为150 r·min-1时除糖效果好,时间短;在酒精浓度为85%,温度为50℃,超声功率为100 W,时间为30 min的条件下提取效果良好,熊果酸浸提率为0.2512%,提取物中熊果酸含量＞20%。 2山茱萸提取物和熊果酸的抗癌活性研究 本文利用非激素依赖型前列腺癌细胞PC—3培养体系研究了山茱萸提取物、熊果酸对前列腺癌细胞生长的影响,并用倒置显微镜观察药品处理后细胞形态的变化。MTT细胞生长抑制率试验表明:山茱萸提取物及熊果酸对前列腺癌细胞PC—3均有抑制作用,两种药品处理时间为48 h,山茱萸提取物处理的浓度为200 mg·L-1,熊果酸标样处理的浓度为80 mg·L-1。倒置显微镜观察结果表明:两种药品处理前后PC—3细胞形态有明显变化。 3山茱萸提取物及熊果酸抗氧化活性研究 本实验以山荣萸提取物和熊果酸为原料,茶多酚作为参照抗氧化剂,采用FRAP法测定并比较山茱萸提取物和熊果酸总抗氧化能力。结果表明:山茱萸提取物和熊果酸均有抗氧化性,抗氧化能力:茶多酚＞山茱萸提取物＞熊果酸。