竹叶总黄酮提取及纯化工艺的研究

本文首先对竹叶中总黄酮的含量进行了测定，得每克干竹叶中总黄酮含量为13.65mg，与文献报导的用甲醇浸提，用WYGC18色谱柱，以甲醇:水:磷酸(60:40:0.5)(v:v:v)为流动相，以254nm为检测波长，测定的竹叶中黄酮总量在5.9～13.1mg/g的范围基本相符。 其次对竹叶中黄酮的最佳提取条件进行了研究，确定了乙醇浸提是最佳的提取方法，确定了64％(v/v)乙醇，料液比1:30(w/v)，浸提时间6小时，温度80℃，浸提2次，pH值10.5为竹叶中黄酮的最佳浸提条件。在此条件下所得浸提液的吸光值可达0.286，即每克干竹叶的浸提液中含有黄酮12.41mg，则可得浸提率为90.59％。 然后对竹叶提取液中黄酮的纯化进行了研究，得出竹叶黄酮的最佳精制条件为：以大孔吸附树脂ADS-17为竹叶黄酮的专用分离树脂，采用吸附流速为3mL/min，洗脱流速为1.5mL/min，径高比为1:7.5，吸附原液pH值为9，洗脱剂选择40％乙醇溶液，洗脱剂用量为3BV(树脂床体积)。在此条件下得到的洗脱液再采用真空冷冻干燥的方法，得到竹叶黄酮的黄褐色粉末。 最后对竹叶黄酮的黄褐色粉末进行了鉴定，得：产品中黄酮纯度为28.04％，经ADS-17树脂依次吸附、洗脱后，产品中黄酮纯度变为原来上柱前样液的3.274倍，提高约2倍多，产品黄酮得率为3.744％。产品中总糖含量的测定结果为38.65％，含氮化合物含量(以蛋白质量计)仅为1.58％；利用颜色反应检验产品中黄酮类化合物可能属于黄酮醇类或黄酮类，利用薄层层析定性产品中黄酮类化合物可能属黄酮类，利用紫外光谱定性产品中黄酮类化合物具有黄酮的吸收光谱特征，综上所述，可以确定产品中黄酮类化合物可能属黄酮类。