含药辐照脱细胞真皮基质的实验研究

目的:制备含药辐照脱细胞真皮基质(xeno-ADM),了解其多项生物性状并观察移植效果。为治疗大面积深度烧伤或严重创伤后皮肤缺损提供一种良好的方法。 方法:用1mol/L高渗盐水、0.25%胰蛋白酶和0.5%曲拉通(TritonX-100)溶液联合脱细胞法制备脱细胞异种真皮后,在1200mg/L三氯生溶液中消毒浸泡,行60CO照射处理制备出含药脱细胞异种真皮,并对其进行微生物检测和组织学观察。将家兔30只,体重2-2.5㎏,雌雄不拘,适应性饲养一周,单笼喂养,随机分为自体刃厚皮移植组(A组)、脱细胞异种真皮和自体刃厚皮复合移植组(B组)和含药辐照脱细胞异种真皮+自体刃厚皮复合移植组(C组),每组10只,其中A组为对照组。对各组进行淋巴细胞增殖活性的检测和细胞因子IL-2、IL-10含量的测定。移植后于2、4、6、8、12周对各组评价创面愈合情况及作组织学观察。 结果:脱细胞异种真皮基质中的表皮已经完全除去,胶原纤维粗细均匀,排列规则,无明显的变性,真皮中无细胞及细胞碎片存在。含药辐照脱细胞异种真皮体外抑菌作用明显强于单纯脱细胞异种真皮(P<0.05);A组OD值为0.1783±0.0325,B组OD值为0.1801±0.0540,C组OD值为0.1732±0.0326,三组淋巴细胞增殖活性比较无显著差异(P>0.05)。三组IL-10和IL-2含量表达无显著差异,B组与A组组间差异无显著性( P>0.05),C组和A组组间差异无显著性(P>0.05);术后A组创面收缩较严重,而B、C组创面收缩程度轻,外观平整,质地良好,胶原纤维排列有序,表面-真皮连接结构重建部明显,基底细胞桥粒、半桥粒结构及基底膜重建明显。 结论:含药辐照脱细胞异种真皮基质中细胞成份去除完全,胶原纤维三维结构保持完整,含药辐照脱细胞异种真皮组只具有很弱的免疫原性,不引起显著的排斥反应,且具有良好的局部抗菌作用,因而是一种理想的真皮替代物。