菊芋ISSR-PCR反应体系的建立与优化

被引:15
作者
赵孟良
韩睿
李莉
机构
[1] 青海省农林科学院菊芋研发中心青海省蔬菜遗传与生理重点实验室
关键词
菊芋; ISSR-PCR; 优化;
D O I
10.16213/j.cnki.scjas.2012.01.061
中图分类号
S632.9 [其他];
学科分类号
090202 ;
摘要
利用正交试验设计的方法,从Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶浓度4因素对菊芋ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度及退火温度进行梯度检测。结果表明:菊芋20μl最佳反应体系包括10×PCR buffer,200μmol/L dNTP,0.5μmol/L引物,1.5 mmol/L Mg2+,1.0 U Taq DNA聚合酶和50 ng模板DNA。这一优化系统的建立,将为菊芋种质资源鉴定及遗传多样性的研究奠定基础。
引用
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