基于PI3K/Akt信号通路探讨肉桂酸保护H2O2诱导H9c2细胞损伤的作用机制

被引:6
作者
魏科东 [1 ]
吴婉婉 [1 ]
任涵 [1 ]
赵婉竹 [2 ]
丁芮 [1 ]
陈明 [1 ]
周鹏 [1 ,3 ]
王靓 [1 ,3 ]
黄金玲 [1 ,3 ]
机构
[1] 安徽中医药大学中西医结合学院
[2] 安徽中医药大学中医学院
[3] 中药复方安徽省重点实验室
关键词
肉桂酸; 氧化应激; 细胞凋亡; PI3K/Akt信号;
D O I
10.13210/j.cnki.jhmu.20240408.001
中图分类号
R285 [中药药理学];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的:探讨肉桂酸对H2O2诱导的心肌细胞H9c2损伤的保护作用及与PI3K/Akt信号通路的关系。方法:借助生物信息学预测慢性心力衰竭的作用机制,利用H2O2(100μmol/L)诱导心肌细胞H9c2构建氧化应激损伤模型,设正常组、模型组、肉桂酸(1、2、4μmol/L)组,采用CCK8法检测肉桂酸(1、2、4μmol/L)对H2O2诱导的H9c2细胞活力的影响,Hochest33342/PI双染色法和流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞ROS水平,比色法检测氧化应激标志物SOD、MDA、LDH、GSH和CAT水平,RTqPCR法检测细胞PI3K、Akt、caspase9、caspase3、Bax、Bcl2 mRNA水平,Western blot法检测细胞PI3K、pPI3K、Akt、pAkt、caspase3蛋白表达。加入LY294002(PI3K抑制剂)后对细胞凋亡率、ROS、SOD、MDA、LDH、GSH、CAT水平,PI3K、pPI3K、Akt、pAkt、caspase3蛋白表达进行检测。结果:生物信息学分析出慢性心力衰竭的发生、发展主要与PI3K/Akt信号通路有关。体外实验结果显示,肉桂酸能显著提高H2O2诱导后心肌细胞活力(P<0.01),降低细胞凋亡率和ROS、MDA、LDH水平(P<0.01),提高SOD、GSH、CAT水平(P<0.01),下调caspase9、caspase3、Bax mRNA水平和caspase3蛋白表达(P<0.05),上调PI3K、Akt、Bcl2mRNA水平和pPI3K、pAkt蛋白表达(P<0.05)。加入LY294002后,逆转了对肉桂酸对心肌细胞H9c2的上述作用(P<0.05)。结论:肉桂酸可通过调控PI3K/Akt信号通路抑制H2O2诱导的心肌细胞H9c2氧化应激损伤和细胞凋亡,保护心肌细胞。
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