烟草环斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清的制备

被引:9
作者
朱常香
宋云枝
王玫玫
王秀芳
温孚江
机构
[1] 山东农业大学生命科学学院,山东农业大学生命科学学院,山东农业大学生命科学学院,中国农业科学院烟草研究所,山东省作物生物学重点实验室山东泰安,山东省作物生物学重点实验室,山东泰安,山东泰安,山东省作物生物学重点实验室,山东泰安,山东泰安,山东青州,山东泰安
关键词
烟草环斑病毒; 外壳蛋白基因; 原核表达; 抗血清;
D O I
暂无
中图分类号
S432.41 [];
学科分类号
摘要
烟草环斑病毒(Tobaccoringspotvirus,TRSV)是我国二类进境检疫危险性有害生物,对农业生产危害较大。本研究依据TRSV外壳蛋白基因cp序列设计合成了2条引物,通过RT-PCR扩增得到长约1500bp的目的片段。将目的片段与质粒pET-22b(+)连接,构建了含TRSVcp基因的融合蛋白原核表达载体pETRSV-CP。序列分析表明,TRSV-SD1的cp基因全长1548bp,编码515个氨基酸与GenBank中其它TRSV分离物cp基因相比,核苷酸及推导的氨基酸序列同源性为90.7%94.6%。将pETRSV-CP转入大肠杆菌,诱导表达。SDS-PAGE结果显示,表达的TRSVCP融合蛋白的相对分子质量约为58kDa。以此融合蛋白制备的抗血清的效价为1/1024,抗血清与TRSV具有良好的特异性反应。
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