利用嘧啶核苷磷酸化酶基因工程菌酶法合成5-氟尿苷的转化率影响因素的研究

被引:4
作者
吴晓
倪孟祥
朱晓丽
王旻
吴梧桐
机构
[1] 中国药科大学微生物制药教研室
关键词
基因工程菌BL21; 嘧啶核苷磷酸化酶; 5-氟尿苷; 微生物转化; 转化率;
D O I
10.19526/j.cnki.1005-8915.2008.04.012
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
研究酶法合成5-氟尿苷(5-FUR)的反应条件。利用嘧啶核苷磷酸化酶(Pyrimidine-nucleosidephos-phorylase,PyPNase)基因工程菌大肠杆菌BL21(DE3)/pET28a+合成5-氟尿苷(5-FUR),考察不同反应条件对转化率的影响;尝试不同反应体系对转化率的影响。结果:(1)最佳转化条件:菌体:0.5WCG/L;UR:10mmol/L;5-FU:45mmol/L;PBS:40mmol/L;T:50℃;pH7.4;t:60min,转化率可达91.27%;(2)以Na2SO4溶液为溶剂,比以PBS溶液为溶剂的转化率略有提高。微生物酶法合成5-氟尿苷(5-FUR)的转化率较高,可考虑用于工业生产。
引用
收藏
页码:282 / 285
页数:4
相关论文
共 7 条
  • [1] 产气肠杆菌EAM-Z1荚膜的去除对胞内PyNPase活力和菌体生长量的影响
    倪孟祥
    张绍谭
    石峰
    沈振宇
    张文婷
    吴梧桐
    [J]. 药物生物技术, 2007, (04) : 264 - 267
  • [2] 利用产气肠杆菌EAM-Z1转化合成5-氟尿苷的转化率影响因素的研究
    张绍谭
    倪孟祥
    张文婷
    王璐
    魏芳
    顾苗
    吴梧桐
    [J]. 药物生物技术, 2005, (01) : 32 - 35
  • [3] 产气肠杆菌EAM-Z1尿苷磷酸化酶的分离纯化及性质研究
    阮期平
    周长林
    徐旭东
    吴梧桐
    [J]. 微生物学报, 2003, (03) : 354 - 360
  • [4] 酶法合成5-氟尿苷
    雷霆
    周长林
    窦洁
    吴梧桐
    [J]. 药物生物技术, 2000, (02) : 102 - 105
  • [5] 酶法合成核苷类抗病毒药物附视频
    邱蔚然
    丁庆豹
    [J]. 中国医药工业杂志, 1999, (10) : 44 - 48
  • [6] 制备鸟苷类化合物及其中间体的方法[P]. 三上洋一,松本清一郎,林良宪,佐藤丰树. 中国专利:CN1320706,
  • [7] 嘌呤核苷化合物的制备方法[P]. 三上洋一,松本清一郎,吉中信二,须永阳之助,长谷川绫美. 中国专利:CN1207417,