合成酮内酯类3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B糖多孢红霉菌M的构建

被引：25

作者：

张部昌

赵志虎

王以光

马清钧

机构：

[1] 军事医学科学院生物工程研究所

[2] 中国医学科学院医药生物技术研究所

[3] 军事医学科学院生物工程研究所北京安徽大学生命科学学院

[4] 合肥

[5] 北京

来源：

生物工程学报 | 2002年 / 02期

关键词：

糖多孢红霉菌; 3-脱氧-3-羰基红霉内酯B; 酮内酯类; 原生质体转化; 同源重组;

D O I：

10.13345/j.cjb.2002.02.039

中图分类号：

TQ465 [抗菌素制造];

学科分类号：

100705 ;

摘要：

大环内酯类抗生素基因工程是近年来研究的一个新领域 ,迄今已合成了 10 0多种新的聚酮类化合物。以糖多孢红霉菌A2 2 6基因组DNA为模板 ,用重叠PCR方法扩增出去除KR6酶域DNA的约 3 2kbDNA片段 ,克隆于pWHM3载体 ,构建了同源重组质粒pWHM2 2 0 1。PEG介导原生质体转化法将pWHM2 2 0 1转入糖多孢红霉菌A2 2 6 ,并整合于染色体红霉素合成基因位点。整合体在R3M斜面上生长两代后 ,制备原生质体涂R3M平皿。利用PCR鉴定筛选出 8株KR6敲除的突变体糖多孢红霉菌M(1 8)。ZabsPecFab质谱鉴定 ,证实糖多孢红霉菌M1合成了 3 脱氧 3 羰基红霉内酯B ,一种新的酮内酯类化合物

引用

页码：198 / 203

页数：6

共 4 条

[1] 红霉素生物合成的分子生物学 [J].