和厚朴酚对热打击F98细胞的保护作用机制研究

被引：2

作者：

李红波 ^{[1
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林新峰 ^{[1
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刘南 ^{[2
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温敏勇 ^{[1
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赵锋利 ^{[1
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吴思慧 ^{[1
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苏磊 ^{[3
]}

王林 ^{[2
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机构：

[1] 广州中医药大学第一附属医院重症医学科

[2] 广州中医药大学第一附属医院急诊科

[3] 中国人民解放军广州总医院重症医学科

来源：

中药新药与临床药理 | 2018年 / 29卷 / 03期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

和厚朴酚; F98细胞; 热打击; 活性氧; p38MAPK; MK2;

D O I：

10.19378/j.issn.1003-9783.2018.03.013

中图分类号：

R285.5 [中药实验药理];

学科分类号：

1008 ;

摘要：

目的探讨和厚朴酚(HNK)对热打击F98细胞的保护作用机制。方法建立F98细胞热打击模型,实验分为正常对照组、模型组(热打击组,HS组)、HNK组(10,20μmol·L-1)剂量组。采用CCK-8检测细胞活力、流式细胞仪分析ROS探针荧光强度、Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,采用WesternBlot检测丝裂原活化蛋白激酶家族(MAPKs)及其下游激酶MK2、PRAK磷酸化水平,分别给予MAPKs家族抑制剂、转染MK2及PRAK失活性腺病毒、不同剂量HNK预处理细胞,检测各组细胞ROS及细胞凋亡水平。结果 1.热打击可诱导F98细胞内ROS水平升高介导细胞凋亡,ROS具有促凋亡作用,经过HNK预处理的细胞ROS、细胞凋亡水平明显下降,以高剂量组作用更为明显(P<0.05)。2.热打击可激活F98细胞内MAPKs家族的p-p38、p-ERK、p-JNK,并证实只有p38MAPK参与调节F98细胞内ROS累积并介导细胞凋亡,经过HNK预处理F98细胞后,可明显抑制p38、ERK的磷酸化水平,并可下调ROS及细胞凋亡水平。3.热打击可激活细胞内的p-MK2、p-PRAK,加入MAPKs家族抑制剂预处理后证实二者均为p38的下游激酶;加入HNK可显著抑制MK2及PRAK,给MK2特异性抑制剂CMPD-1及转染MK2、PRAK失活性腺病毒预处理细胞,结果表明,经过CMPD-1及转染MK2失活性腺病毒预处理的F98细胞的ROS水平及细胞凋亡水平明显下降,高剂量HNK可显著抑制平p38、MK2的磷酸化,明显降低热打击F98细胞的ROS及细胞凋亡水平。结论 HNK通过抑制p38/MK2路径下调ROS水平对热打击F98细胞发挥保护作用。

引用

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页数：7

共 14 条

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