圆弧青霉碱性脂肪酶的分离纯化和特性

圆弧青霉突变株ＰＧ３７ 发酵液经离心、硫酸铵盐析、疏水层析、阴离子交换层析和凝胶过滤分离纯化得到了比活性为每毫克蛋白质５ ２００ ｕ 的碱性脂肪酶， 纯化倍数１６ ．５ ， 得率３３．２％ ， 在聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）和ＳＤＳ 聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ ＰＡＧＥ）上均呈现单一蛋白质条带。ＳＤＳ ＰＡＧＥ 和凝胶过滤分别测得酶的分子量为２７．５ ｋＤ和２９ ｋＤ， 表明该酶以单体形式存在。Ｎ末端１０ 个氨基酸的序列测定结果为ＡＴＡＤＡＡＡＦＰＤ， 与已知的碱性脂肪酶的Ｎ 末端序列没有同源性。酶学特性研究结果表明， 该酶的最适作用温度为２５ ℃， 在３０ ℃以下稳定，４０ ℃处理２０ ｍｉｎ 仅残留３０ ％ 酶活性；ｐＨ 稳定范围在６．５～１０．５ ， 最适ｐＨ 为１０ ．０ 。低浓度的碱性蛋白酶对ＰＧ３７ 碱性脂肪酶活性的影响较小， 可同时添加在洗涤剂中。