IPTG与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达

被引:6
作者
李攀峰
张洪斌
胡雪芹
机构
[1] 合肥工业大学医学工程学院制药工程系
关键词
异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷; 乳糖; 右旋糖酐蔗糖酶; 表达; 联合诱导;
D O I
暂无
中图分类号
Q814 [酶工程];
学科分类号
082203 ;
摘要
研究异丙基硫代-β-D-呋喃半乳糖苷(isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达的效果。在利用IPTG和乳糖分别作为诱导剂对右旋糖酐蔗糖酶工程菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET28-dexYG进行诱导表达的基础上,尝试将此两种诱导剂联合使用,在降低成本的同时获得较好的表达效果。在获得最佳培养基的基础上,考察菌体IPTG与乳糖的联合加入量、菌体浓度、诱导时间对右旋糖酐蔗糖酶表达的影响。在菌浓(OD600 nm)达到3.0时,加入0.1 mmol/L IPTG 95μL+2.5 g/L乳糖,25℃混合诱导培养4 h,酶活力最高,达到40.44 U/mL。IPTG与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达可行。
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页数:4
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