Ki-67启动子转录调控结构与功能研究

被引：5

作者：

李中林 ^{[1
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钱国伟 ^{[2
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徐为 ^{[2
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李望 ^{[2
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张宝福 ^{[2
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刘俊杰 ^{[2
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陈菲菲 ^{[2
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田卉 ^{[2
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章龙珍 ^{[2
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郑骏年 ^{[2
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机构：

[1] 徐州医学院附属医院神经外科

[2] 徐州医学院肿瘤生物治疗实验室

来源：

中华实验外科杂志 | 2010年 / 09期

关键词：

Ki-67基因; 启动子; 转录调控;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

目的观察Ki-67核心启动子调控元件对转录调控的影响。方法根据Ki-67启动子结构软件分析结果,对Ki-67核心启动子(-223～+30)内的5个调控区域,包括(+13～+30)及4个潜在Sp1结合位点(-198～-172)、(-170～-144)、(-63～-37)和(-14～+12)进行内部缺失,目的片段缺失的Ki-67核心启动子插入pGL3-Basic载体,构建报告基因重组体质粒。将重组体分别转染肿瘤Hela、SW1990、SGC-7901、A549细胞株,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,并与Ki-67核心启动子质粒pGLBK2+转录活性比较。结果缺失(+13～+30)的启动子重组体质粒在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著提高,分别达到缺失前的1.2、2.0、1.7、1.4倍。缺失潜在Sp1结合位点的4个启动子重组体在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著降低,其中缺失(-170～-144)后转录活性最小,在4种肿瘤细胞中分别降至未缺失前的16.2%、10.4%、6.7%、12.2%。结论 Ki-67启动子(+13～+30)区包含负性调控元件,对其缺失后形成的新的Ki-67核心启动子(-223～+12)是更好的调控肿瘤基因治疗的启动子。(-198～-172)、(-170～-144)、(-63～-37)和(-14～+12)可能存在潜在的Sp1顺式作用元件,其中-170～-144区域的顺式作用元件最为重要。

引用