白羊草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

被引：9

作者：

李钰莹

董宽虎

王若梦

杨静芳

机构：

[1] 山西农业大学动物科技学院

来源：

中国草地学报 | 2012年 / 34卷 / 04期

基金：

高等学校博士学科点专项科研基金;

关键词：

白羊草; ISSR; PCR反应体系; 优化;

D O I：

暂无

中图分类号：

S543 [多年生禾本科牧草];

学科分类号：

090502 [动物营养与饲料科学];

摘要：

采用正交试验与单因素、双因素设计结合的方法,对白羊草ISSR-PCR反应体系的Mg2+、dNTP、模板DNA、Taq DNA聚合酶及引物5种主要因素进行优化。确立了白羊草最佳反应体系及扩增程序:25μL体系中dNTP 0.2mmol/L、Taq酶1.0U、引物0.6μmol/L、Mg2+2.5mmol/L、DNA模板30ng、10×PCR Buffer 2.5μL;扩增程序:94℃预变性5min,94℃变性45s,50～60℃(退火温度随引物不同而定)退火60s,72℃延伸90s,共35个循环,72℃后延伸5min。

引用

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页数：6

共 10 条

[1]

系统与进化植物学中的分子标记.[M].邹喻苹等编著;.科学出版社.2001,

[2]

不同水肥条件下白羊草光合生理生态特征研究 Ⅲ.叶绿素荧光参数 [J].