燕麦ISSR反应体系的建立与优化

被引:32
作者
刘欢 [1 ]
慕平 [2 ]
赵桂琴 [1 ]
孙丽坤 [1 ]
机构
[1] 甘肃农业大学草业学院
[2] 甘肃农业大学农学院
关键词
燕麦; ISSR分子标记; 反应体系; 优化;
D O I
暂无
中图分类号
S543.7 [];
学科分类号
摘要
以10个燕麦品种的基因组DNA为模板,从退火温度、TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTP、引物5个方面对ISSR分子标记体系进行摸索并设计优化试验,建立了一套燕麦ISSR优化反应体系,即:25μl反应体系中,18.3μlddH2O,2.5μl 10×buffer,2.0μmol/L Mg2+,250μmol/L dNTP,1.5 U Taq DNA聚合酶,0.3μmol/L引物,10ng DNA模板。反应程序为:94℃预变性3 min;94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1 min,34个循环;72℃延伸5 min,4℃保存。
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